文档介绍：第一步:固定固定能防止组织自溶及***,尽量保持组织原貌固定液通过以下机制稳定蛋白:相互交联:甲醛与蛋白质交联蛋白沉淀:蛋白变性沉淀合理固定很重要,为了:防止组织在处理中受损经处理组织能易于切片docin/sundae_meng固定不当的后果固定不当会导致手工及自动IHC及ISH检测结果出现片状或不正常染色,从而影响免疫组化检测结果判定固定不全过程交联过程发生较慢,很易逆转若固定时间过短,会发生交联不全,组织将被下一步的乙醇固定经乙醇沉淀的蛋白其抗原结构会改变,因而不适用于IHC及ISH检测docin/sundae_meng固定过度固定时间过长可能导致假阴性检测结果过度多聚化阻止了抗原暴露,因而影响抗原修复docin/sundae_meng影响固定的因素组织类型从标本手术切除至开始固定的时间待检标本的体积及厚度固定液类型(10%福尔马林)固定液与组织体积比(至少10:1)固定的时间温度docin/sundae_meng从标本离体到开始固定的时间为防止组织自溶,待检组织从手术离体至开始固定之间的时间应尽可能短乳腺癌最多1小时胃癌应控制在20–30分钟内docin/sundae_meng固定液种类推荐10%中性缓冲福尔马林(NBF)作为乳腺癌及胃癌组织的固定液(IHC或ISH)10%NBF等同于4%甲醛溶液交联简单的固定液应使用新鲜福尔马林溶液,福尔马林贮备液应:定期更换(最多贮存6个月)室温贮存标记生产日期或稀释浓度以及过期日期固定不当会导致手工及自动IHC及ISH检测结果出现片状或不正常染色,从而影响免疫组化检测结果判定docin/sundae_meng固定时间乳腺组织用于HER2检测的手术切除组织样本(IHC或ISH检测),一般固定6–48小时胃组织手术切除及活检组织样本,一般固定8–48小时固定时间取决于待检组织类型--组织取样手段,组织厚度及固定液不同的检测程序应使用优化的相应固定时间docin/,。太大太厚的组织块常会固定不充分,而影响脱水和制片。docin/sundae_meng第三步:脱水目的:因为石蜡不溶于水,所以需从组织中除去水分梯度脱水:75%,85%、95%,100%乙醇若无乙醇,其他溶剂例如异丙醇亦可用于脱水docin/sundae_meng第四步:透明因乙醇和石蜡不相溶,所以需用另外一种溶剂用于透明的溶剂既能同乙醇混溶,又能与石蜡混溶常用透明剂包括:二甲苯L-苧烯***仿松节油(TO)使用“透明”该词是因组织会变为透明docin/sundae_meng