乙型肝炎病毒 DNA YMDD 变异的检测技术.pdf

文档介绍：PO Box 2345 Beijing 100023, China World Chin J Digestol 2004 July;12(7):1674-1677
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Email: wcjd@ 归世界胃肠病学杂志社
•文献综述•
乙型肝炎病毒变异的检测技术
蔺淑梅, 军张树林
蔺淑梅成军中国人民解放军第 302 医院传染病研究所基因治疗研究经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者也存在变
中心,

张树林, 西安交通大学第一医院传染科陕西省西安市异,即这类患者对拉米夫定存在先天性耐药因
国家自然科学基金攻关项目
军队“九、五”科技攻关项目, 此,拉米夫定治疗前及治疗期间监测的变化对
, 选择治疗方案及调整治疗用药,提高疗效都具有十分
军队“十、五,
军队“十、五”科技攻关面上项目, No. 01MB135 重要的意义现就目前变异的实验室检测方法综
项目负责人: 成军, 100039, 北京市西四环中路 100 号,
302 医院传染病研究所基因治疗研究中心, .
验室
电话传真: [phone]
收稿日期: 接受日期: 1 检测方法
核苷酸序列测定法突变的经典检测方法为
摘要 DNA 测序法,测序法也是检测 HBV DNA 多聚酶基因
拉米夫定治疗乙型肝炎耐药性的产生主要与HBV P基因突(PCR)产物直
[12-14]
变有关,耐药株中多见P基因变异且相对集中于基接测序和重组克隆测序检测P基因变异.
序. YMDD变异的检测技术包括核苷酸序列测定法、聚合酶分别采用聚合酶链式反应及限制性片段长度多态性技
术、PCR 产物直接测序和重组克隆测序
链反应-限制性片段长度多态性分析、基因芯片技术、聚
检测 P 基因变异,认为克隆后测序的结果最精
合酶链反应微板核酸杂交噶C庖唣じ椒ǖ
确. Honkoop et al 采用测序法检测在拉米夫定治疗过
肝炎病毒.
程中 HBV DNA 再次出现阳性的 5 例慢性乙型肝炎患者
蔺淑梅, 军, . 乙型肝炎病毒变异的检测技术. 界华血清,发现 4 例存在基序的变异张永忠 et al [16]
人消化杂志 PCR产物直接测序技术检测了拉米夫定治疗48 wk
9-3079/12/
后血清 HBV DNA 仍阳性的例患者血清中 HBV DNA
P 基因序列,并推到为相对应的氨基酸序列,同时和
引言 GenBank 中标准株序列相比较,结果有例患者检出
核苷类似物拉米夫定治疗乙型肝炎的主要机制为抑制变异,其中型 8 例,都伴有变
乙型肝炎病毒(P)从而干扰病毒异, 型 12 例,其中 2 例伴有变异.
逆转录过程,阻碍病毒 DNA 的合成和转录. HBV 拉米夫定耐药株的检测多采
可迅速抑制慢性乙型肝炎患者体内的 HBV 复制,使患用 DNA 测序的方法,测序法虽然可靠,也可检测出多
者血清HBV DNA转阴,在慢性乙型肝炎抗病毒治疗中位点的变异,但只能检测血清中的一种优势株,对于混
显示了令人鼓舞的效应但临床应用中发现,拉米夫定合型感染通常不能