文档介绍：水中大肠杆菌群书的检测(发酵法) 一、试验目的: 。。二、试验原理: 水的微生物学的检验,特别是大肠杆菌的检验,在保证饮水安全和控制传染病上有着重要意义,同时也是评价水质状况的重要指标。国家饮用水的标准规定饮用水中大肠杆菌群书每升中不超过 3个,细菌总数每毫升不超过 100 个。水中大肠杆菌的检验方法,常用多管发酵发和滤膜法。多管发酵发可运用于各种水样的检验,但操作繁琐,需要时间长。滤膜法仅用于自来水和深井水。操作简洁快速,但不适用于杂质较多,易于阻塞滤孔的水样。三、实验器材: 1. 水样: 自来水 2. 试剂:乳糖蛋白胨发酵管内有倒置小套管三倍浓缩乳糖蛋白胨发酵管瓶内有倒置小套管伊红美蓝或复红亚硫酸钠琼脂平板革兰氏染液。 3. 仪器及其它用品: 载玻片灭菌带玻璃塞空瓶灭菌吸管灭菌试管革兰氏染液显微镜香柏油二甲苯擦镜纸吸水纸灭菌三角瓶等四、实验步骤: 第一步: 1. 水样的采集自来水洗将自来水龙头用酒精灯火焰灼烧灭菌,在开放水龙头取水流 5 mh,以灭菌山角瓶接水取样以备分析。 2. 用发酵法检查大肠杆菌(1 )生活饮用水的检验①初步发酵试验:在2 个各装有 50 mh的 3 倍乳糖蛋白胨培养液的三角瓶中, 以无菌操作各自加水样 10 mh 。摇匀后, 37℃培养 24h 第二步: ②平板分离:经 24 h培养后。特产酸产气及只产酸的发酵管,分别划线接种于伊红美蓝琼脂平板( EMD 培养基上), 37℃培养 18~ 24h。大肠杆菌群在 EMD 平板上, 菌落呈紫黑色, 具有或略带或不带有金属光泽, 或者呈淡紫红色, 仅中心颜色较深, 挑取符合上述特征的菌落进行涂片, 革兰氏染色,镜检。第三步: ③复发酵试验: 将革兰氏阴性无芽孢杆菌的菌落的剩余部分接于单倍乳糖发酵管中, 为防止遗漏, 每管可接种来自同一初发酵管的平板上同一类型菌群 1~3 个, 37℃培养 24 h,如果产酸又产气者,即证实有大肠菌群存在。第四步: ④报告:根据证实有大肠菌群存在的复发酵管的阳性管,查表,报告每升水样品中大肠菌群数( MPN ).