文档介绍：粪大肠杆菌的测定——多管发酵法
多管发酵法

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 YXQ-LS-50SⅡ

粪大肠菌群的测定有什么意义呢?
水中含有的细菌总数与水污染状况有一定关系,但是不能直接说明是否有病原微生物存在。粪便污染指示剂指的是如有该指示菌存在于水体中,表示曾有过粪便污染,也就有可能存在肠道病原微生物。那么该水质在卫生学上是不安全的。常见的指示菌有:总大肠菌群、粪大肠菌群、粪链球菌、产气荚膜梭菌等。我们实验室以粪大肠菌群作为指示细菌。
总大肠菌群中的细菌除生活在肠道中外,在自然环境中的水与土壤中也经常存在,但此等在自然环境中生活的大肠菌群培养的最合适温度为25℃左右,如在37℃培养则仍可生长,℃,则不再生长,而直接来自粪便的大肠菌群细菌****惯于37℃左右生长,℃仍可继续生长。因此,可用提高培养温度的方法将自然环境中的大肠菌群与粪便中的大肠菌群区分。
方法简介
上海跃进生化培养箱SPX-80

  适用于环境环保、卫生防疫药检、农畜、水产等科研院校生产部门。是水体水析和BOD测定,细菌、霉菌、 微生物的培养、保存、植物栽培、育种试验的专用恒温设备。

容积(L) :80 
工作电压:220V/50HZ 
额定功率(kw) ≤300
控温范围(℃) 5~50 
温度波动度(℃) ≤±1 
控温精度(℃) ≤± 
工作室尺寸 :300x480x550
全自动立式压力蒸汽灭菌器 YXQ-LS-50SⅡ

灭菌器容积:50L; 控温范围:109℃~135℃; 
电源电压:交流220V±10%,50HZ±1%; 
 加热器功率:3200VA;3500VA; 
工作最高压力:;温度:135℃; 
环境温度:5℃-40℃;相对湿度≤80%RH

乳糖蛋白胨培养液
蛋白胨 10g
牛肉浸膏 3g
乳糖 5g
***化钠 5g
%溴甲酚紫乙醇溶液 1ml
100ML蒸馏水溶解,~,%溴甲酚紫乙醇溶液
高压灭菌锅115度
EC培养液
胰胨 10g
酵母浸膏 3g
乳糖
***化钠 5g
胆盐三号
1%苯***蓝水溶液 10ml
1%玫瑰色酸溶液 10ml
100ML蒸馏水溶解,~,于115度灭菌15分钟,放入冰箱中备用,使用前分别加入1ml 1%苯***蓝水溶液和1%玫瑰色酸溶液
操作流程
 
将水样充分混匀后,根据水样污染的程度确定水样接种量。每个样品至少用三个不同的水样量接种。同一接种水样量要有五管。 
相对未受污染的水样接种量为10mL、1mL、。受污染水样接种量根据污染程度接种1mL、、 、、 等。使用的水样量可参考下表1。
2. 初发酵试验
将水样分别接种到盛有乳糖蛋白胨培养液的发酵管中。在37℃±℃下培养24h±2h。产酸和产气的发酵管表明试验阳性。如在倒管内产气不明显,可轻拍试管,有小气泡升起的为阳性。
3 复发酵试验
轻微振荡初发酵试验阳性结果的发酵管,用3mm 接种环或灭菌棒将培养物转接到EC培养液中。℃±℃温度下培养24h±2h(水浴箱的水面应高于试管中培养基液面)。接种后所有发酵管必须在30min 内放进水浴中。培养后立即观察,发酵管产气则证实为粪大肠菌群阳性。
4、结果的计算
根据不同接种量的发酵管所出现阳性结果的数目,从表3 中查得每升水样中的粪大肠菌群。