文档介绍:中国兽医杂志年第卷第期
亚群禽白血病病毒株的分离
与基因序列分析
乔彦华,王永强,庞平,金铮,陈福勇
中国农业大学动物医学院,北京海淀
摘要:本试验通过病理剖检、接种细胞、及检测,从北京某种鸡场的疑似禽白血病的父母代蛋鸡中
分离到株亚群禽白血病病毒,命名为。并根据中已发表序列设计引物,扩增基因片段并将其克隆
到一载体中,扩增的基因片段大小为,其中包括完整的基因,将基因亚克隆到
,基因大小为,编码个氨基酸。将基因片段和推导的氨基酸序列与
中株的基因相应序列做同源性分析并制作进化树图谱。发现与已发表的亚群禽白血病病毒
株该区域核苷酸同源性在. ~ ,氨基酸同源性在. ~ . 。其中与.
.同源性最高,核苷酸同源性为,氨基酸同源性为. ;且与—
.亲缘关系最近。本研究为该毒株的生物学特性以及致病性研究打下基础。
关键词:禽白血病病毒;基因;基因;序列比较
中图分类号:. 文献标识码: 文章编号:——一
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禽白血病是由禽白血病病毒—
收稿日期:——,引起的以造血细胞恶性增生为主的一类
基金项目:农业部优质土鸡生产关键技术研究示范项目传染病。目前分为个亚群,、、、
为外源性病毒,为内源性病毒。根据临床分类,禽
作者简介:乔彦华一,女,硕士,研究方向为微生物与免疫
通讯作者:陈福勇,—: ..“白血病又可分为淋巴细胞性白血病、成红细胞性白
中国兽医杂志。年第卷第期
血病、成髓细胞白血病和髓细胞样白血病等。在自。
然条件下,以淋巴细胞性白血病—. 核苷酸序列测定及分析将构建的阳性重组
,最为常见。主要由外源性的和亚群病质粒一一和一一
毒引起,少数由和亚群引起。送至北京诺赛公司测序。并用计算机软件将测序结
本研究对北京某种鸡场发病的父母代蛋鸡地果与株已发表的有代表性的国内外毒株相
方品种进行剖检,从脾脏中分离到株禽白血病病应的核苷酸和氨基酸序列进行比较分析并制作进化
毒,命名为。扩增其基因片段并克隆树图谱。参考毒株为: 亚群代表株、
到一—载体中,将测序结果与已发表亚群美国株、、——
序列进行同源性分析和制作进化树,确定病毒亚群亚群中国山东分离株、——亚群原
和在病毒进化上的地位。然后将基因亚克隆始毒株、一、—亚群中国株、
入一—载体,测序并分析氨基酸—亚群代表株、———亚
序列的变异程度。:、
致病性研究打下基础。、、、、、
、、。
材料与方法
结果
. 病料来源年月,北京某种鸡场日
龄的套父母代蛋鸡地方品种陆续出现死亡, . 剖检病变剖检疑似禽白血病的病鸡,发现肝
病程为两个月,死淘率为。发病鸡消瘦、精神委脏肿大并有弥散性肿瘤图、脾脏肿大、卵巢萎缩
靡、鸡冠发白。剖检病鸡,将病变的组织一℃保存。等病理变化。
. 细胞、质粒与菌株一细胞由扬州大学秦
爱建教授惠赠;一—购自—
公司;购自北京博大泰