文档介绍:中国农业科学院学位论文牛腺病毒椭泄掷胫甑募ḿ叭ɑ蜃樾列分析硕士研究生:于作师:薛飞研究员申请学位类别:农学硕士业:预防兽医学研究向:动物传染病防治技术培养单位:哈尔滨兽医研究所研究生院论文编号:指导教专方提交日期月密级:。一●一‘、。‘■
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睁鳓硌启乡\\.‘\\泠,嘴衍垆仁馑彩莉中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目专业研究方向动物传染病防治技术指导教师培养单位芯克硕姓名单位签名伊论文作者于作薛飞职称导师顾导团孙元牛腺病毒椭泄掷胫甑募ḿ叭ɑ蜃樾蛄蟹治预防兽医哈尔滨兽医研究所评硕导团傅殿国研究员吉林省畜牧兽医总站预防兽医学博导口副研究兰州兽医研究所人尚佑军答辩硕导口主赵启祖中博导团王云峰曲连东博导囹刘胜旺冯力委师东方教授东北农业大学陈启军吉林大学会议记录厥论文答辩时间地点年展跏抟窖芯克醣ǜ嫣阅贝员/\口.’.
甫乡月/独创性声明关于论文使用授权的声明作研究生签名:于柞印或扫描等复制毛段保在悴媒瑰嗜圃童圭垦壅些型堂堕里坠旦至旦查塞垄不年∥月日年;其时间:畂,襢矽/本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名:导师签名:时阃:劲聃时间:
摘要牛腺病毒珺,为腺病毒科溉槎锵俨《臼的成员,属于牛腺病毒,第一群,能在已建立的牛细胞系中良好生长,且与其他哺乳动物腺病毒存在共同的补体结合抗原。是引起牛呼吸道疾病的主要病原体之一,特别是新生犊牛。临床上主要以肺炎等呼吸道症状为主,常伴发混合感染和继发感染,并能够引起新生仓鼠肿瘤。近年来,我国犊牛呼吸道肺炎频繁发生,给养牛业造成严重经济损失。自年等首次从健康牛结膜中分离获得以来,感染已在世界范围内广泛流行,目前我国还没有有关牛腺病毒偷谋ǖ溃挥邢喙氐恼锒鲜约梁疫苗。本研究于年由患急性呼吸道病牛鼻拭子中分离获得一株病毒,该牛表现精神沉郁,呼吸困难,体温℃以上,流鼻液等。将采集的牛鼻拭子处理后取上清液接种于细胞盲传至第二代出现了特征性的山脊状细胞病变;电镜下观察可见立体对称结构,大小约的病毒粒子,与腺病毒相符;直接免疫荧光试验结果表明分离株与荧光标记的山羊抗多克隆抗体反应呈阳性。微量试验结果表明,该分离株能凝集牛红细胞,效价为孕∈蟆大鼠、豚鼠、鸡、马和绵羊的红细胞无凝集作用;病毒热敏感试验表明℃芄皇狗掷胫的值下降个滴度,℃蛲耆鸹睿梅掷胫晔粲贐第一群;根据已发表的全基因组序列,在蚯杓铺匾煨砸铮猿樘岬腂掷胫闐为模板进行┰龀龀ぴ的目的片段。锟寺〔庑蚝螅贓基因的进化树分析表明分离株与属于同一分支,且对虮嗦氩顳蛋白同源性比较分析显示,分离株与已报道的同源性最高,在以上,而与其它腺病毒的同源性较低。综合以上试验表明该分离株为,命名为辍U馐枪谑状畏掷牖竦肂谋ǖ馈本研究参考螧曜级局闣的全基因组序列设计了对引物,对分离到的中国株腥ɑ蜃椴庑颍峁砻鱄株基因组全长为珹斗为.%,课ァS隬株全基因组进行比较分析,结果显示暝区有大段碱基缺失,但二者各段基因的核苷酸相似性较高,为./ィ桓鞫位虮嗦氲陌被嵯嗨菩砸步细撸%。基于腺病毒全基因组的进化树分析表明,暧隑曜级局晖葱宰罡撸饨徊街っ髁薍株本研究对国内首次分离到的牛腺病毒虷株进行了鉴定和全基因组测序,对其生物学特性和分子特征进行了分析,为以后开展相关诊断试剂和新型载体疫苗研究奠定了良好的基础。关键词:牛腺病毒停掷耄ǎ珽基因,全基因组测序区和为。
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录目甶牛腺病毒图蚪椤的形态与特征⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.基因组结构和编码蛋白概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..的抗原性及理化特性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..的细胞培养⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..的增殖⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..的流行病学⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.的临床症状及病理变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯的诊断⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..的预防及控制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.作为病毒载体的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.载体的优点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.载体的构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.载体的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯芯磕康暮鸵庖濉第二