文档介绍：第卷第期同济大学学报医学版..
年月..
· 基础研究·
在大鼠茄病镰刀茵性角膜炎中的表达
朱江莉,崔红平,英瑛
.上海市第八人民医院眼科,上海;.同济大学附属第十人民医院眼科,上海
【摘要】目的研究基质金属蛋白酶,在大鼠茄病镰刀菌性角膜炎中的表达,
分析与真菌性角膜炎发病的关系,为针对抑制活性治疗真菌性角膜炎提供理论依据。方法角膜
划痕法联合角膜接触镜法制作大鼠茄病镰刀菌性角膜炎动物模型;应用实时荧光定量聚合酶链式反应.
,—和免疫组织化学染色检测一在水平和蛋白质水平的表达。
结果正常大鼠角膜组织中有的表达,一分布于角膜上皮层的少数基底细胞;茄病镰刀茵感染
角膜后,表达明显上升,主要分布于浸润的炎症细胞。结论的表达与真菌性角膜
炎角膜病变的严重程度呈正相关,在真菌性角膜炎的发病中可能具有重要作用。
【关键词】基质金属蛋白酶.;真菌性角膜炎;茄病镰刀茵
【中图分类号】. 【文献标识码】【文章编号】———
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收稿日期:——
基金项目:上海市科委年基础研究重点项目
作者简介:朱江莉一女,住院医师,硕士研究生.:.
通讯作者:崔红平.:.
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同济大学学报医学版第卷
真菌性角膜炎以化脓性炎症为主要病理特征, /的茄病镰刀菌中国普通微生物菌种保藏
其组织病理学改变与各种蛋白水解酶对角膜组织的中心:.孢子悬液接种在角膜面,覆盖
降解有着直接联系。在各种水解酶之中,基质金属膜自制角膜接触镜,,
蛋白酶,作为降解缝合睑缘针使睑裂闭合。接种后第天拆除睑缘
角膜组织细胞外基质, 的缝线,取出。
主要酶类逐渐引起了研究学者的关注。根据接种后第天、第天和第天随机选取只
作用底物不同主要分为胶原酶、基质溶素、明胶酶和大鼠进行病原学检查。用无菌蒸馏水充分冲洗大鼠
膜型等。属明胶酶,不仅降解角膜基角膜后,刮取病灶边缘和底部组织,刮取物行%
质的主要成分型胶原纤维,还可降解角膜上皮层氢氧化钾、革兰染色和马铃薯葡萄糖琼脂
基底膜的主要成份Ⅳ型胶原纤维,基底膜完整性的,固体培养基培养等真菌、细菌
破坏将有利于真菌感染向角膜深部组织甚至眼内扩学检查,以明确接种真菌感染,排除混合感染、继发
散。所以,本实验采用大鼠茄病镰刀菌性角膜炎动细菌感染等可能性。
物模型,通过实时荧光定量聚合酶链式反应—. 术后检查和取材
,—和免分别于接种后第天、第天、第天、第天、
疫组织化学染色检测一在水平和蛋白第天和第天取大鼠角膜只,另取大鼠正常
质水平的表达,观察一在真菌性角膜炎发病角膜只。其中,每组只角膜保存于% 多聚
中的作用。甲醛,用于免疫组织化学染色;只保存于液氮,用
于—。
材料与方法
. —检测的表达
. 动物模型的制作通过研磨组织和试剂提取角膜组织总
健康大鼠只,雌雄不限,体质量,紫外分光光度仪测量提取的总的浓度
—,由复旦大学动物科学部提供,许可证号: 和质量。取用
沪—。手术前,氧氟沙星滴眼Ⅲ—试剂盒进行反转录、扩
液点眼,次/。%戊巴比妥/腹腔麻醉增,