文档介绍：泰山医学院
硕士学位论文
不同品系小鼠诱导实验性白色念珠菌性角膜炎的研究
姓名:邹嫣丽
申请学位级别:硕士
专业:免疫学
指导教师:宋文刚;王宜强
2012-02
测受染角膜组织中基质金属蛋白酶及其抑制因子Ⅷ琓鴖徒涸宋确不同品系小鼠诱导实验性白色念珠菌性角膜炎的研究专业:免疫学中文摘要中又捅要研究生:邹嫣丽导师:宋文刚教授王宜强教授真菌性角膜炎病机理尚未明确。本研究主要选用两种常见的小鼠品系/∈蠛虲/∈建立实验性真菌性角膜炎模型,通过比较两种小鼠在发病及转归过程中的表现及各相关分子的变化水平,进而研究真菌性角膜炎发病的相关机制。方法选用相同周龄雄性/∈蠛蚦/∈螅捎媒悄せ首⑸浞ㄗ⑸痬咨钪榫咦觢建立小鼠的真菌性角膜炎模型。从感染后第炱每隔炝严兜葡鹿鄄臁⒉杉计⒔辛俅财婪帧T诟腥竞蟮牟煌奔涞闶占浆和受染角膜,组织病理学检查受染角膜组织中炎性细胞的浸润及真菌的生长情况,真菌负荷实验检测受染角膜组织中真菌孢子含量鼐,酶联免疫吸附剂测定实验觳庋=褪苋窘悄ぴ冉褐蠭—暮浚凳倍縋检子基因表达水平的变化,免疫荧光技术验证感染后第焓苋窘悄つ贗猯达情况。两种品系的小鼠在角膜基质注射白色念珠菌孢子后均感染了严重的角膜炎。在感染早期,小鼠角膜水肿、溃疡,后期病情减退。但相比于/∈螅珻/膜炎直至感染后的第天仍有大量的炎性细胞浸润,基质层机化仍很明显,而相应目的現是一种致盲率极高的感染性角膜病,其发肿拥谋结果小鼠诱导笤谙嘤Ω魇奔涞愕钠骄膊》质;且在感染后期/∈笫苋窘悄ぶ鸾セ指赐该餍裕饔谡W刺欢鴆/∈笾敝恋仍可见较大的角膜斑翳。角膜组织病理学检查结果显示小鼠的白念菌性角
显多于埃痗小鼠。检测结果发现两种品系小鼠受染角膜组织中大多数基因角膜内这三个因子的表达量明显高于/∈;、及表达水平存在动态变化,,田一琓于感染后的第煅杆偕卟⒋时间点/∈蠼悄つ谘仔韵赴罅考好飨约跎,基质层细胞数有所减少,角膜厚度趋于正常。真菌负荷检测结果显示两种品系小鼠受染角膜真菌负荷数随着天数的推移呈现明显的下降趋势,至感染后第天,真菌负荷数趋于5小鼠在相应各时间点角膜组织菌落计数都较/∈蠖。结果显示感染早期两种品系小鼠血浆及受染角膜组织中均有较高水平—的表达,,沟谋泶锪吭蛎飨陨摺8腥驹缙冢琧/∈笱浆及受染角膜组织中一的表达量均明显高于/∈;而在感染中后期∈笱=笆苋窘悄ぷ橹蠭的表达量明显低于/∈。免疫荧光技术检测进一步验证了募觳饨峁丛诎咨钪榫越悄ぱ自缙苋窘悄け憧杉觳獾酱罅康腎褻/∈蠼悄つ贗谋泶锩到高峰,这一现象在两种品系小鼠的检测结果中都可以观察到,但在小鼠的表达略有增高,其中/∈,可见和的表达量继续升高并达到高峰,且/∈笠廊幻飨愿哂贑/∈,、和騰。,。结论遗传背景不同的小鼠感染真菌性角膜炎后表现不同,炎性因子.、辜损伤修复相关因子佃徒涸宋仍谄渲蟹⒒又匾5淖饔茫赜诟髦址子在真菌性角膜炎中的确切功能及细胞来源还需进一步的研究。关键词:角膜炎;不同品系;白色念珠菌
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符号说明锄疵吖髓时㏄英文缩写英文全称中文全称真菌性角膜炎白色念珠菌性角膜炎菌落形成单位白介素干扰素丫转筹胎牛血清苏木素和伊红碘酸雪夫染色酶联免疫吸附剂测定磷酸盐缓冲液光密度乙二胺四乙酸样受体基质金属蛋白酶金属蛋白酶组织抑制剂蛐徒涸【Ⅳ型胶原链实时定量核糖体蛋白错误发现率印——行—璭——衪一丫痑琣鴖
应答的研究较少,但可以肯定的是真菌侵入角膜后,通过啪豢焖偈侗穑刖真菌性角膜炎現是一种由致病真菌引起且致盲率极高的感染性角膜病,部分地区已取代细菌性角膜炎而成为角膜盲的首要病因【】;其发病原因主要是致病真菌在机体免疫力低下或是角膜外伤时侵袭角膜而引起的。在发达国家,的主要致病因素为角膜接触镜的广泛使用,白色念珠菌为其主要的致病菌;而发展中国家则主要是由角膜外伤引起,致病真菌多为镰刀菌【俊=昀此孀趴股和糖皮质激素的广泛使用,以及诊断水平的提高,的发病率不断升高【俊H欢于缺乏有效的抗真菌药物,使得真菌性角膜炎的治疗仍十分棘手,对于严重的患者,目前治疗主要是以角膜移植为主,而由于供体材料缺乏、移植术后真菌的复发和手术存在一定的排斥反应等因素,从而大大降低了真菌性角膜炎的治愈率,因此,深入研究的发病机制对临床的治疗及相关药物的开发都具有重要的意义。目前,相比于病毒性角膜炎和细菌性角膜炎,对于真菌性角膜炎的研究相对比较滞后,尤