文档介绍：年月安徽大学学报自然科学版
第卷第期.
●
:/..—...
系膜细胞膜固相色谱法研究丹皮中的效应成分
朱建梁,黄丽妹,卜文婕,开桂青,樊宏伟,李献华,孙敏
.安徽大学生命科学学院,安徽合肥;.南京医科大学附属南京第一医院临床药理实验室,
江苏南京;.亳州市华佗中医院,安徽毫州
摘要:丹皮常被用于治疗肾病的中药复方中,但其活性成分并不明确,因此,采用肾小球系膜细胞膜固相色
,并作为固定相选择性结合丹皮中的活性成分,排除未
与细胞膜靶点结合的非活性成分后,使细胞膜靶点失活,解离系膜细胞膜上被结合的活性成分,用对解
,因此认为丹皮酚是丹皮中的效应成分.
关键词:丹皮;系膜细胞;细胞膜囤相色谱法;丹皮酚
中图分类号:;. 文献标志码: 文章编号:———
—,—,,.,.。,—,
.,, ,;.,
,, ,;.
,,
:.
,
.
,
. ,
.,
.
:;;;
,性微寒味苦,具有清热凉血、活血散
瘀功效,常被用于治疗肾病的中药复方中”.丹皮含牡丹酚、牡丹酚甙、牡丹酚
原甙、牡丹酚新甙、芍药甙、氧化芍药甙、苯甲
酰芍药甙—、苯甲酰氧化芍药甙—、没食子酸等.
肾小球系膜细胞是一种最活跃的肾小球固有细胞,位于肾小球毛细血管袢之间,
邻接内皮细胞或基底膜,其形态不规则,系膜细胞在多种因素如高糖、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、机械牵拉、
收稿日期:—~
基金项目:安徽省自然科学基金资助项;安徽省教育厅自然科学基金资助项目
作者简介:朱建梁一,男,湖南双峰人,安徽大学硕士研究生; 孙敏通信作者,安徽大学副教授,
—: ..
第期朱建梁,等:系膜细胞膜固相色谱法研究丹皮中的效应成分
炎症反应、脂质沉积等刺激下,可表现为氧化应激,促进肾小球硬化的发生和发展,因此系膜细胞通常为
肾小球疾病治疗的靶点,
法分析丹皮中与肾小球系膜细胞结合的效应成分.
实验部分
. 仪器
超高压液相色谱仪—,美国公司:二极管阵列检测器,四元梯度泵、自动
进样器、柱温箱、在线真空脱气机;色谱柱.,.,美国公司;
全自动多功能酶标仪,德国公司;离心机,公司;混悬
仪,海门其林贝尔仪器制造有限公司;旋转蒸发器一,上海亚荣生化仪器厂;循环水式多用真空
泵.—,郑州长城科工贸有限公司;电子天平,赛多利斯科学仪器北京有限公司;其
他为一般常规仪器.
. 试剂和材料
牡丹采自安徽省铜陵市凤凰山,由安徽大学生命科学学院王开金教授鉴定;/培养基和
小牛血清为公司产品;丹皮酚标准品购自中国生物制品检验鉴定所;乙腈和乙酸为美国
公司产品;去离子水由~系统制备;小鼠肾脏系膜细胞株购自上海细胞库;
—为公司产品.
. 标准品和样品的制备
丹皮酚对照品溶液的配制:将丹皮酚溶解在甲醇中,终浓度为·一,保存在冰箱中备用.
供试液的制备:丹皮药材打碎,过目筛,加入倍%的乙醇,常温浸泡,减压回收后浓缩
至含生药材,放冷,离心,上清经.