文档介绍：七年制专业学位论文
论文题目耐辐射球菌 PprI 蛋白细胞毒性及
免疫毒性的研究
毕洁静
研究生姓名
杨占山
指导教师姓名
临床医学七年制
专业名称
放射毒理学
研究方向
2012-6-15
论文提交日期
学位论文独创性声明
本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立
进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文
不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不含为获得苏
州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作
出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人承担本
声明的法律责任。
论文作者签名: 毕洁静日期:
学位论文使用授权声明
本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定,
即:学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸
质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献
信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、
中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子
文档,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或其他复制手段
保存和汇编学位论文,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数
据库进行检索。
涉密论文□
本学位论文属在年月解密后适用本规
定。
非涉密论文
论文作者签名: 毕洁静日期:
导师签名: 杨占山日期:
耐辐射球菌 PprI 蛋白细胞毒性及免疫毒性的研究中文摘要
中文摘要
目的:
pprI 基因是耐辐射球菌中的特有基因,被认为是耐辐射球菌 DNA 修复与保护
途径的总开关,基因的表达产物 PprI 蛋白是一种促进 DNA 修复的多效蛋白的诱导
物。近年来我科室研究人员研究证实 pprI 基因转染对哺乳动物中子和γ射线急性
放射损伤具有显著的防治作用,原核表达纯化取得的 PprI 蛋白,也被证实对γ射
线辐射损伤小鼠具有一定的抗放作用。本课题在此蛋白作用机制的基础上,对其
细胞毒性及免疫毒性作了初步的研究,为其以后的临床应用前安全性评价提供依
据,目前关于此蛋白的毒性研究,尚未见国内外文献报道。
材料与方法:
PprI 蛋白由本实验室张永芹硕士通过原核表达纯化,以人脐静脉血管内皮细
胞为作用对象,应用 MTT 法检测 PprI 蛋白对细胞的增殖、毒性作用,采用细胞克
隆法检测该蛋白对辐射细胞存活的影响,并绘制出剂量存活曲线。以 ICR 小鼠作
为免疫对象,实验组分为生理盐水免疫组和 PprI 蛋白免疫组,通过免疫器官脏器
系数及 T 淋巴细胞亚群变化观察此蛋白对小鼠免疫功能的影响。
结果:
本课题初步研究得出,PprI 蛋白浓度为 、5、10ug/ml 范围内对细胞产生
抑制作用,且抑制作用与蛋白浓度呈正相关,细胞密度 ×104 作用时间 24h 的
细胞半抑制率 IC50 为 ug/mL。照射剂量为 6Gy 时,PprI 蛋白浓度为 100、
200、400、600ng/ml 范围内对细胞产生增殖作用,蛋白浓度 400ng/mL 作用 36h 时
增殖作用最为显著。由多靶单击模型拟合的细胞存活曲线得知,PprI 蛋白组 D0 值
为 ,Dq 值为 ,N 值为 ,SF2 值为 ,各值均高于单纯照射组。在
小鼠免疫及免疫后三周的观察期间内,计算免疫器官脏器系数可知,免疫初期即
初次免疫后 14 天,高剂量组肾脏重量系数显著低于生理盐水对照组(P<),
1
中文摘要耐辐射球菌 PprI 蛋白细胞毒性及免疫毒性的研究
中、高剂量组胸腺重量系数均显著高于生理盐水对照组(P<);免疫末期即
末次免疫后 3 天,低剂量组肾脏重量系数显著低于生理盐水对照组(P<),
高剂量组胸腺重量系数显著高于生理盐水对照组(P<);恢复期即末次免疫
后 3 周,高剂量组肝脏重量系数显著高于生理盐水对照组(P<),低剂量组
胸腺重量系数显著高于生理盐水对照组(P<)。由 T 淋巴细胞亚群检测结果
可知,末次免疫后 3 天,中剂量组小鼠脾脏 CD3+ T 细胞含量显著高于生理盐水对
+ +
照组( P<),高剂量组 CD3 CD8 T 细胞含量显著高于生理盐水对照组( P<),
高剂量组 CD4 /CD8 比值显著低于生理盐水对照组(P<)。
结论:
PprI 蛋白浓度达到