文档介绍：南方医科大学
博士学位论文
MG诱发的炎性反应参与METH纹状体神经毒性的研究
姓名:乔东访
申请学位级别:博士
专业:病理学与病理生理学
指导教师:王慧君
20080520
诱发的炎性反应参与纹状体神经毒性的研究摘要博士研究生:乔东访指导教师:王慧君教授损敏感脑区发生的哪些变化与其激活有关芩鹉郧谑欠翊嬖谀承┮蛩囟结论,更缺乏系统性的研究。研究背景毒品滥用是当今各国都面临的社会问题。由于依赖性精神药物的直接药理学作用靶器官是中枢神经系统,因此其对中枢神经系统损伤的研究一直倍受关注。有很强的精神刺激性和依赖性,且其被滥用的趋势近来逐年上升。目前的研究表明,的神经毒性作用与某些活性物质的产生密切相关,如活性氧、一氧化氮及其次级产物取S烧庑┗钚晕镏仕辗⒌囊幌盗猩经毒性事件,是导致损伤敏感脑区グ防嗌窬┥发生不可逆性实质损伤的主要因素,而诱发的炎性反应在其中发挥了十分重要的作用。炎症是机体一种防御性的反应,但如不能有效地加以控制,则导致组织损伤。有研究表明,参与了中枢神经系统内多种病理缟窬拘约恋亩拘运伤、帕金森病等神经慢性疾病、局部缺血甚至脑外伤跫碌穆匝字⒎从Γ并加重了组织细胞的损伤。同样作用后,受损的敏感脑区内出现了的激活,表明参与了损伤的过程。作为中枢神经系统内固有的唯一免疫细胞类型,与上述神经炎性损伤过程密不可分。但由于中枢神经系统的复杂性,毒性剂量所引发的激活及其诱发的炎性损伤反应的研究还存在很多疑问:如与的激活之间有什么直接关系贛せ畹氖背讨校激活及其后续炎性反应具有调节作用杂谏鲜鑫侍猓两裎从惺置魅返本研究内容系在本室近几年来研究中枢毒性损伤机制的基础上,通过体内和体外不同实验体系,对的激活及其所继发的炎症病理损伤过程作博士学位论文
为研究主线,为阐明这一炎症反应损伤发生的确切机制提供实验证据。中枢神经系统内,由于的神经毒性对单胺能神经末梢具有选择性,因此我们选择纹状体为研究对象。研究纹状体内激活的时程变化、形态学变化、表型变化,及其激活时程内的病理损伤事件;模拟毒性作用初期微环境的变化趸,在体外条件下研究内相关的炎症反应细胞信号调节通路蛋白表达的变化等。通过上述研究,来初步明确激活及诱发的炎症反应在神经毒性损伤中的作用。研究方法甅斡隡笫竽晕谱刺逖仔运鹕说难芯、和进行取材及各项检测。,—双阳性细胞率的变化,进一步明确的激活。纹状体内导致激活的诱因及调控因素在前期明确的激活水平及时程变化的基础上,,以及纹状体的损伤程度进行研究。具体包括:、免疫组化法检测表达量的变化以及透射电镜观察纹状体内神经纤中文摘要研究目的实验模型的复制及纹状体内激活特性的研究动物模型为成年雄性大鼠逯,骄治J笛樽骨蛔⑸銶疜次,每次间隔和对照组┓绞较同,每次注射硌嗡,分别于首次注射后第的主要因素及相关的调控因素。内容主要包括:高效液相色谱法检测纹状体内多巴胺含量、约梁屑觳馕谱刺迥诨钚匝鹾亢蚖法检测纹状体内参与的炎性反应损伤及途径和维及末梢的超微结构改变。
新生大鼠原代培养体系的建立和皮质神经元的分离的表达量及胞内表达定位、毒性剂量作用下,实验大鼠出现了典型的刺激症状,表明成功复制出中毒动物模型。“实验组谱刺迥贛翁П浠喊灞浯螅逋庋趸ぬ跫翸募せ罴癈分子对其激活和炎性反应的调控作用通过同系新生大鼠脑皮质原代的分离纯化培养和皮质神经元的分离,以及氧化应激条件激活模型的建立,来研究氧化应激条件下斡氲控激活及调控方式的初步研究。主要研究内容包括:采用利多卡因疞砑安钏偬诘姆椒ɑ竦么炕脑鶰⑼ü舛ㄉで线来评价原代培养体系的稳定性;,进行皮质神经元分离,并进行肿表达率鉴定,为研究肿佣訫せ罴凹せ詈笱仔苑从Φ牡鹘谧饔媒实验基础。体外氧化应激条件下激活模型的建立及斡氲牡骺刈饔以/为阳性对照,分别采用蚆疞4硪蛩兀⒓觳釳募せ钐匦浴R源俗魑;。囱芯糠离得到的神经元匝趸ぬ跫翸募せ罴把仔苑葱藕磐返牡节作用。主要研究内容包括:氧化应激条件下,通过法及免疫荧光标记法检澳ḿ觳..鞍妆泶锪俊法检测各组培养液中虸暮康谋浠明确急性分离的神经元参与调控激活及其调控方式。实验结果甅斡隡卸径锬P痛笫竽晕谱刺逖仔运鹕说难芯动物模型的复制及纹状体内激活特性的研究胞突起变短,形态丰满,呈“灌木丛样涣碛胁糠諱灞浯蟆⑼黄鹣В博士学位论文
,,呈“阿米巴样”:透射电镜下见激活的胞体明显变大,胞核电