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催化共振散射光谱法测定α-淀粉酶、过氧化氢和葡萄糖.pdf

文档介绍

文档介绍:广西师范大学
硕士学位论文
催化共振散射光谱法测定α-淀粉酶、过氧化氢和葡萄糖
姓名:马纪
申请学位级别:硕士
专业:分析化学
指导教师:蒋治良
20080501
广西师范大学硕士论文中英文摘要

催化共振散射光谱法测定α-淀粉酶、过氧化氢和葡萄糖

研究生:马纪导师: 蒋治良教授
专业:分析化学研究方向: 酶催化分析

中文摘要
第一部分:绪论
介绍了共振散射技术理论。综述了近年来共振散射技术在分析化学中的应用,介绍了
α-淀粉酶、过氧化氢和葡萄糖的分析进展。

第二部分:可溶性淀粉的共振散射光谱研究及其在α-淀粉酶活力测定中的应用
在 聚丙烯酰胺(PAM)存在条件下,可获得较稳定的平均粒径为 317nm 的淀粉
微粒。它在 423nm 处有一较强的共振散射峰。在 50℃,pH 为 的磷酸盐缓冲溶液中,
淀粉微粒被α-淀粉酶(α-amylase,AMS)催化水解成小分子,导致 423nm 处共振散射峰强度
降低。在选定条件下,AMS 酶活力浓度在 ~µg/ml(或 -)范围
内与共振散射强度降低值△I 呈现良好的线性关系,其线性回归方程为△I=155C+13,相关
系数 R=。本法应用于人体唾液α-淀粉酶活力测定,结果满意。

第三部分:HRP 酶催化-阳离子表面活性剂缔合微粒共振散射光谱法测定痕量过氧化氢
- - -
在醋酸缓冲溶液中,辣根过氧化物酶(HRP)可以催化 H2O2 与过量的 I 反应生成 I3 ,I3
分别与阳离子表面活性剂 TDMBA、DDAC、CTAB、ODC、CPCM、DPC 和 TBAB 等形
成缔合物微粒 TDMBA-I3、DDAC-I3、CTAB-I3、ODC-I3、CPCM-I3、DPC-I3 和 TBAB-I3,
该缔合物微粒均在 460nm 处有一个共振散射峰。过氧化氢的浓度在 ~、~
、~、~、~216、~ 和 ~×10-7mol/L
范围内分别与各体系在 460nm 处的共振光谱强度呈线性关系。其检出限分别为 、、
、、、 和 ×10-7mol/L。本法应用于过氧化氢测定,结果满意。

第四部分:双酶催化-阳离子表面活性剂缔合微粒共振散射光谱法测定痕量葡萄糖
在醋酸缓冲溶液中,葡萄糖(G)在葡萄糖氧化酶(GOD)的作用下生成葡糖糖酸和 H2O2,
- - -
HRP 可以催化 H2O2 与过量的 I 反应生成 I3 ,I3 分别与阳离子表面活性剂十四烷基苄基二
甲基氯化铵(TDMBA)、氯代十六烷基吡啶(CPCM)和十二烷基苄基二甲基氯化铵(DDAC)
形成缔合物微粒 TDMBA-I3、CPCM-I3 和 DDAC-I3,该缔合物微粒分别在 460nm、540nm
和 430nm 处有一个共振散射峰。对于 TDMBA、CPCM 和 DDAC 体系,葡萄糖的浓度分
I
广西师范大学硕士论文中英文摘要
别在 ~20×10-7mol/L、~60×10-7mol/L 和 ~40×10-7mol/L 范围内与其在最强的共振
散射峰处的共振散射强度呈线性关系,其检出限分别为 ×10-7mol/L、×10-7mol/L
和 ×10-7mol/L。将 TDMAB 体系应用于人血清中葡萄糖的测定,结果满意。

关键词:α-淀粉酶,过氧化氢,葡萄糖氧化酶,葡萄糖,共振散射光谱
II
广西师范大学硕士论文中英文摘要

Catalytic Scattering Spectral Assay for α-Amylase Activity, H2O2 and glucose

Postgraduate: Ji Ma Supervisor: Prof. Zhiliang Jiang
Specialty: Analytical Chemistry
Field: Enzyme Catalytic Analysis

Abstract

Part I Introduction
Summarized the application of resonance scattering technology in analytical chemistry.
The application of r