文档介绍：实验一、大鼠在体小肠吸收实验实验目的掌握大鼠在体小肠吸收的实验方法。掌握计算药物的吸收速度常数( Ka),以及每小时吸收率的计算方法。・、实验指导大多数药物以被动扩散方式从生物膜的高浓度侧通过膜向低浓度侧转运。被动扩散可用Fick第一定律来描述。该定律指出,扩散速度(dC/dt)正比于膜两侧的浓度差(4C),因此有:b)dt (1)式中C是消化道中药物浓度,Cb是血液中药物浓度,Ka是吸收速度常数,其值大小取决于药物的扩散常数,吸收膜的厚度与面积,及药物对膜的穿透性。胃肠道吸收的生物学过程包括这样一个系统,即药物从胃肠道屏障的一侧(吸收部位)向另一侧(血液)扩散。因为进入血液的药物很快分布到全身, 故与吸收部位比较,血中药物浓度维持在很低的水平。几乎在所口服给药的情况下,对于胃肠道来说, 血液(室)的作用尤如一个“水槽”(sink)。并且在整个吸收相保持很大的浓度梯度, C>>G,则△8C,于是(1)式可以简化为dcdtKaC(2)用消dXadtKaX此为一级速度方程式的标准形式。胃肠道按一级动力学从溶液中吸收大多数药物。化液中药物量的变化(dXWdt)表示扩散速度,则:将(3)式积分,并在方程两侧同取对数。lnXalnXa(O)Kat ⑷式中Xa为消化液中药物量,Xa(0)为零时刻消化液中药物量, Ka为药物吸收速度常数。以InXa对t作图得一条直线,其斜率为药物在小肠中的吸收速度常数(Ka)。实验内容与操作仪器蠕动泵;分光光度计;红外灯;手术剪;止血钳;乳胶管;烧杯;固定板;电热恒温水浴锅。试剂(1)%NaNO液;(2)%氨基磺酸铵(NHSONH)溶液;(3)%二盐酸萘乙二胺溶液(偶合试剂); (以上置冰箱保存),(4)1mol/LHCI;(5);(6)生理盐水;(7)Krobs-Ringer试液(,,,,,,);(8)戊巴比妥钠溶液(10mg/ml,。);(9)磺胺嘧啶(Sulfadiazine,SD)。(1)取85ml供试液(100mlKrobs-Ringer试液含SD2mg酚红2mg加入循环装置的烧瓶中。(2)将实验前禁食一夜,体重 200g左右的雄性大鼠,称重,腹腔注射戊巴比妥钠(),麻醉后并加以固定。(3)沿腹中线打开腹腔(约3厘米长)。自十二指肠上部及回肠下部各剪开一个小口,,用线扎紧,并用 37C的生理盐水将小肠内容物冲洗干净,然后将大鼠串联到循环装置中。开动蠕动泵,(1ml、)为药物和酚红零时间样品,并补加2ml酚红溶液(每毫升Krobs-Ringer试液含酚红20卩g)其后每15分钟取样(1ml、),同时补加酚红溶液。由于酚红不被小肠吸收,用以测定水被小肠吸收的量。定量方法(1)磺胺嘧啶的定量取样品1ml,加入1mol/LHCl5ml,%NaNO1ml,摇匀,放置3分钟,%氨基磺酸铵1ml,摇匀,放置3分钟。%萘乙胺2ml,摇匀,放置20分钟。在550nm处测