文档介绍：PCR基因扩增仪****题一、名词解释PCR技术:通过加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNA杂交,在TaqDNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物,重复上述过程至25・40个循环,达到体外扩增核酸序列的目的。TaqDNA聚合酶:一种从嗜热水生菌(Thermusaquaticus)分离得到的热稳定DNA依赖的DNA聚合酶。水浴锅PCR基因扩增仪:属于第一代PCR基因扩增仪,以不同温度的水浴锅串联成一个控温体系。压缩机PCR基因扩增仪:属于第二代PCR基因扩增仪,由压缩机自动控温,金属导热。Overshooting:指升温过程中,由于一些加热元件,比如半导体、金属块本身会积蓄能量,虽然温度探头探测到温度到达了设定温度,但半导体、金属块上积蓄的能量仍然会传给PCR体系,造成实际的温度高于设定的温度。Undershooting:在降温过程中出现一个降温惯性,从而造成实际温度会短时间的低于设定的温度。半导体PCR基因扩•增仪:属于第三代PCR基因扩增仪,由半导体自动控温,金属导热。&离心式空气加热PCR基因扩•增仪:属于第三代PCR基因扩增仪,由金属线圈加热,采用空气作为导热媒介。梯度PCR仪:带梯度PCR功能的基因扩增仪,在反应过程中每个孔的温度控制条件可以在指定范围内按照梯度变化,根据结果,一步就可以摸索出最适合的反应条件。原位PCR仪:带原位扩增功能的基因扩增仪。原位PCR技术:即在细胞内进行PCR扩增,组织细胞的形态不被破坏,是原位杂交与PCR技术结合而形成的新技术。荧光实时定量PCR技术:在PCR反应体系中加入特异性的荧光染料或探针,通过检测荧光信号,实时监测整个PCR反应过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。13•位置的边缘效应:指PCR基因扩增仪最外周的样品孔温度与屮间的样品孔冇差异,不均一,从而导致外周样品孔的PCR扩增效率不佳,该效应称为“位置的边缘效应”。:仪器根据探测器直接探测承载样品金属基座的温度进行控制,该模式适用于长时间的静态孵育,如连接、酶切、去磷酸化等。15・反应管温控模式:仪器根据探测器所探测到的温控模块的温度由计算机计算出样品管内或PCR板孔内样品液的温度來进行控制。三、简答题什么是聚合酶链反应(PCR)技术?答:PCR技术的木质是核酸扩增技术,通过加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNA杂交,在TaqDNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物,重复上述“变性一退火一引物一延伸”过程至25・40个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数,可以在体外对目的核酸进行大量复制。PCR基因扩增仪的工作关键是什么?经历了怎样一个发展过程?答:PCR基因扩增仪工作关键是温度控制。其发展过程为:水浴锅PCR仪属于第一代PCR基因扩增仪,以不同温度的水浴锅串联成一个控温体系;压缩机PCR仪属于第一•代PCR基因扩增仪,由压缩机自动控温,金属导热,控温较第一代PCR基因扩增仪方便;半导体PCR仪属于第三代PCR基因扩增仪,由半导体自动控温,金属导热,控温方便,体积小,相对稳定性好;离心式空气加热PCR仪属于第三代PCR基因扩增仪,由金属线圈加热,采用空气作为导热媒介,温度均一性好,各孔扩增效率高度一致。PCR基因扩增仪按照变温方式的