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DNA拓扑异构酶Ⅱ在RA诱导SH-SY5Y细胞向神经元分化过程中的表达.pdf

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DNA拓扑异构酶Ⅱ在RA诱导SH-SY5Y细胞向神经元分化过程中的表达.pdf

上传人:coconut 2014/5/6 文件大小:0 KB

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文档介绍:翩签章:嬲劢研究生签名:寸晶晶导师签章:带婴砀二级学院领导盖章:一』』研究生签名:专,晶晶学位论文使用授权及知识产权归属承诺研究生学位论文独创性声明河北医科大学本学位论文在导师蛑傅夹∽的指导下,由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应的法律责任。爻、,年多月▲罗日本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注等内容外,文中不包含其他人已发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。乏口年譬月工了日甀,⋯√一
录目中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..研究论文仄艘旃姑窱赗盏糞甋细胞向神经元分化过程中的表达前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯..讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.月舀⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.拿口;凇ぁ璴
仄艘旃姑窱赗盏糞细胞向神经元分化过程中的表达要目的:、的表达情况,进一步探讨肷窬只关系。方法:赴嘌篠甋赴煤ヌヅQG濉:、/青霉素、/,链霉素的培养液,置于℃,、饱和湿度的空气培养箱中常规培养。赴ù捍赴诤隙却锏%时,用胰蛋白酶/消化液,℃消化种樱瞥傻ハ赴海个细胞/分别接种于新的培养瓶中,℃,、饱和湿度的空气培养箱中继续培养。赴交恚孩僬6哉眨捍ù换正常传代用培养液。培养笫障赴"诩⒍隽品ǎ捍ù换含,的疐培养基,培养笫障赴S昧魇较赴羌觳庀赴芷诘谋浠⒂脁煅榧觳馄涔钩杀扔形薏钜臁罴裄ǘ群妥罴延盏继跫秆。河盏挤只捎昧街植煌挠盏培养基:诱导分化培养基窃诖ù嘌兄苯蛹尤氩煌ǘ鹊腞诱导分化培养基墙ùù嘌械腇去除,将吭龃髄倍,再加入不同浓度的。在两种诱导分化培养基中加入不同浓度、、畉疞诓煌奔涞、、玫怪孟晕⒕倒鄄旄组形态变化和突起长度的变化。从而筛选出最佳浓度和最佳诱导条件,用于下一步实验。凑兆罴延盏继跫】瞻锥哉兆橄赴妥罴裄盏继跫盏己、的细胞,分别用免疫荧光化学检测、、、、。峁治觯貉∪「髯橄赴ǜ髯門庖哐粜韵胞率,分别进行单因素方差分析。摘酶中文摘要、
E嘌腟甋赴谏ぃ宄氏植还嬖虻亩啾咝危部分细胞有多个短突起,胞核大,核仁清晰。赴交毫魇较赴觳夥治鱿允荆琒甋赴⒍龃后,反映细胞增殖能力的/ハ陆盗ィ璛煅椋τ谠殖期的细胞构成比明显少于正常培养组,差异有显著性。此时,处于期的细胞比例为.%,说明有大量细胞达到同步。罴延盏继跫秆。河捎谟盏挤只嘌里含有%细胞分化不太同步。诱导分化培养基锊缓現,在诱导下可向神经元快速同步分化,并且分化程度与浓度呈正相关,在条件下分化效果最好。所以最佳诱导条件选择诱导分化培养基/T诖俗罴延盏继跫拢赴黄鹁秃苊飨裕蓖黄鸾步延伸、增粗,且交织成网,可见许多具备成熟神经元样形态特征的细胞;时成熟神经元样细胞数量无显著变化。,在时分化基本结束。谏鲜鲎罴延盏继跫拢诳瞻锥哉兆橹校琈和在核周体内均有少量表达。在组,泶镒罡撸琈和表达比空白对照组高,但不如龈呙飨裕得鞔耸狈只的神经元尚未完全成熟,仍处于分化过程中。在组,达降低,和表达明显增高,说明此时分化形成的神经元比较成熟,分化基本结束。驹诳瞻锥哉兆橄赴醒粜韵赴.%,在组,阳性细胞率.%.%,在组,阳性细胞率为..%。因为饥饿疗法吞跫嘌中不含焕谙赴鲋常钥白对照组中,.细胞中泶锊皇翘ǜ摺T诜只讨校手鸾サ菁跚魇疲琑橛肫渌阶橹溲粜韵赴实牟钜煊显著性。在空白对照组细胞中,.%,在组,:/
高;在组,神经元逐渐成熟,突起进一步