文档介绍：对盏嫉腟虮泶锏骺氐难芯病理学与病理生理学学位申请人师姜勇教授邬振徐军教授王华东教授潘景轩教授赵克森教授月广州专名称吴翠玲指导教答辩委员会成员汪江淮教授范杰教授论文评阅人课题来源:
对盏嫉腟虮泶锏骺的研究硕士研究生:吴翠玲指导教师:姜勇教授邬振国教授摘要内毒素血症是由痪头诺哪诙舅又名脂多糖,,引起的全身炎症反应综合症,是多系统多种疾病的严重并发症,通常导致致死性感染性休克、多器官功能衰竭、弥漫性血管内凝血等,病死率极高。在内毒素血症过程中,脂多糖可以促使吞噬细胞发生呼吸爆发,释放大量超氧阴离子等活性氧琑Q芯恳丫砻鳎琑在机体的病理生理过程中起着双重作用,一方面,适量的曰逵兄匾5谋;ぷ饔茫涣硪方面,在持续大量的饔孟拢锎蠓肿又省⒌鞍字省等会发生氧化损伤,进而与甉、等致炎因子共同导致广泛性的组织损伤和器官衰竭,使内毒素血症趋于恶化。且恢制毡榇嬖谟谏锾逯械暮鹗衾胱拥某趸锲缁福梢源化超氧化物发生歧化反应,清除氧自由基,进而在抗炎、抗氧化应激、抑制肿瘤、自身免疫疾病方面发挥重要作用。是真核生物囊恢盅切停位于线粒体的锰超氧化物歧化酶吡L迨窍赴谀芰坎脱醮坏闹匾3∷彩亲杂苫某所,由此决定了在抗氧化损伤中的特殊地位。不同亚型的谏锾逯械谋泶锓绞讲煌渲蠸诙嘀肿橹赴中均有表达,但更主要的是受细胞内外各种因素的刺激发生诱导型表达。当细胞受到辐射、氧化剂、细胞因子、却碳な保琒泶锵宰盘岣撸机体免受氧自由基的损伤。因此研究各种刺激因素尤其是盏嫉腟达调控机制对深入理解在细胞保护中的作用具有重要意义。本实验室在前期工作中已经利用甦际酢⒉钜斓鞍譊掷搿质谱分析等技术,鉴定出了个可能参与盏嫉腟蜃B嫉骺氐鞍祝其中包括。那么,本课题的研究任务是:①验证前期鉴定出的蛋硕士学位论文琈,
采用椒ḿ觳釲刺激对白是否参与了碳は耂谋泶锏骺兀孩谌舾玫鞍子凶B嫉骺刈饔茫进一步证明其在启动子序列上的大致结合范围及相关的信号通路。完成该研究任务后的临床意义:理解内毒素血症过程中高表达的机制,对于发现新的治疗手段很有意义。研究已经表明,启动子序列缺乏盒、盒,但转录起始点上游序列富含碱基,。那么,启动子序列上是否有蛋白的作用位点及其是否受调控,有待于验证。不包含峁褂虻陌司酆塑账峤岷琋是广泛存在于真核细胞中的重要蛋白之一,在基因表达调控中起重要作用。是多功能核蛋白家族的一个成员,在人类该蛋白称为尽8眉易宓牡鞍佐然┒擞霰J氐腞结构域,可以识别、结合8媒峁褂蛴霭被岵谢槌桑占渖闲纬个旷螺旋和蓀一折叠片。除了上述的鯮结构域外,还有鯠峁褂颍个畉甴峁辜捌浜蠼舾个碱性氨基酸或酸性氨基酸共同组成。这些结构特征为其参与多种核内事件提供了基础。最近越来越多的文献报道,参与不同基因的转录调控。例如,⒌鞍紫喙丶羟幸蜃,等蛋白形成复合体,共同参与小鼠基因的表达调控;可以通过其某一位点氨基酸残基的磷酸化或者借助某些桥梁蛋白参与炎症过程中人类大动脉平滑肌细胞瓾淖B嫉骺亍综上,依据以下几点,我们推断,也可能参与了盏嫉腟表达调控:①蛋白结构特征;②文献报道,作为转录因子参与多种基因转录调控的事实;③蛋白是本实验室前期利用多种专业技术从内毒素血症小鼠组织核蛋白中筛选并鉴定出的启动子结合蛋白。为了证实上述推断及相关的启动子区域和信号通路,我们从以下几方面予以验证:检测訰细胞表达的影响细胞表达的剂量效应和时间效应。结果显示,与对照组相比,/、痬/,表达水平均有所增高。以./..
∽躌,进行。.瓹—、甌虎酃沧H緋畇、表达水平的影响。实验分组:①∽,与对照组相比,表达水平在刺激笤黾幼钗C飨浴1臼笛槲=徊教教諰刺激下对表达调控机制奠定了基础。细胞免疫荧光技术检测蛋白在细胞内定位情况细胞中内源性蛋白及细胞中过表达的蛋白,进行细胞免疫荧光检测。结果显示,静息状态下,,胞浆中也有少量分布,碳ず笤诎酥芯奂C飨裕煌庠葱蛋白在静息状态下分布于细胞浆中,亚砷酸钠刺激后移位入核。这些结果证实了蛋白有核内定位现象,为参与核内事件提供了形态学依据。。实验分组:①;④转染结果显示,,而且过表达还可以进一步增强盏嫉腟ü馑孛副ǜ婊蚣际跫觳釴泶锒許舳踊钚缘挠跋臁实验分组:①.、甌虎诠沧H..、甌<