文档介绍：/表达与赴构建糖尿病鼠类模型的初步研究课题来源:国家自然科学基金专学位申请人指导师答辩委员会主席林汉良教授张雅洁教授名称教答辩委员会成员论文评阅人朱梅刚教授月日业南方医科大学级博士学位论文/
/表达与鯝细胞构建糖尿病鼠类模型的初步研究博士研究生:刘繁荣指导教师:赵彤教授摘要研究背景经典型霍奇金淋巴瘤,是组织形态非常特殊的一类淋巴瘤,其肿瘤细胞—瓜赴颊贾琢鲎橹腎/孟赴韧üハ赴治龊虸基因重排证实它起源于生发中心残疾赴景的炎症免疫细胞═细胞、赴⒔赴⒅行粤O赴⑹人嵝粤O赴和肥大细胞等捌湎赴蜃邮荋/细胞赖以生存的基础条件。因此,研究既要注意肿瘤细胞疪挂W⒅仄浔尘懊庖呦赴捌湎赴蜃庸钩傻奈⒒肪场疪赴芪⒒肪车难字⒚庖呦赴訦/细胞的生存是必需的,其炎症免疫细胞以馨拖赴V鳎延兄ぞ荼砻鱄/细胞生存明显依赖其周围细胞释放的生存信号:背景细胞死亡,疪赴觥R虼耍⒅琢龅腍/细胞在体外极难培养;初发在淋巴结,建立疪赴氡尘跋赴餐嬖诘体系,模拟淋巴结内肿瘤状态及生存环境,则是理想的细胞系。但目前均无来自馨徒岬牧鱿赴担仪缚墒南赴稻醋酝砥贖颊叩耐庵苎!骨髓或腹水,如,,,┫赴邓淙徊荒模拟淋巴结内肿瘤状态,但提示疪赴梢岳肟A馨徒嵘妫坏盚/细胞转移到其它器官中,背景细胞依然类似淋巴结内病变;疪赴谝熘忠浦驳拿疫正常小鼠中很难生存庖吲懦馑,疪赴浦驳窖现孛庖呷毕軸鼠可以存活与增生,形成移植瘤,但该瘤无拿庖弑尘跋赴阅壳肮博士学位论文
测了ο赴傲鲎橹腞谋泶铮骄縍赾形成中的作用;上没有真正体现氐愕亩锬P汀与此同时,匦枰览登骰蜃幽技庖弑尘跋赴1究翁庾榍捌诰物信息学分析朊致源驜细胞淋巴瘤趋化因子的差异,发现弑泶锏那骰蜃佑蠷疌、龋诟丛拥囊蜃油绻叵抵蠷τ诮现行牡奈恢茫琀/细胞依赖趋化因子对赴缺尘跋赴骰饔谩9夂臀颐乔捌的实验表明⒒肪诚赴凶钕灾氖荂细胞,特别是赴细胞的重要作用,它和赴黄鹉芤执鳬微环境中的细胞毒性馨拖赴佣欣赾的形成。国外研究表明,姆⑸⒎⒄购蚇畆活性异常增高有关,我们前期的研究结果表明疪赴狢虻捅泶锖蚇出信号持续活化。本课题组前期构建的赴窍担捅泶锸驝颍ㄆ涞娜肪哂蠬/细胞的表型,⒗嗨迫薱病理特征的活体实验动物模型,满足模拟尘盎肪车南赴嘌院鸵蜃痈丛有裕佣诖吮尘微环境基础上才能进行南喙匮芯浚翁庾榍捌诮玬细胞尾静脉注射/笪茨艹闪觯怨菇℉锬P拖萑肓死Ь场1狙芯靠悸堑C庖呦低扯裥灾琢觯浞⑸牖迕庖呷毕萦凶琶芮械墓叵担悄虿∧芙低机体免疫力,有研究证实吞悄虿〔⒎⒘馨土龅姆缦战险H烁男性高ィ女性高%H艚ɡ醋訠痗鼠的赴又滞嗵悄虿∈螅能避免种群排斥,又能避免健康/蟮拿庖吲懦猓鼓芴峁┐τ诿庖咭种状态的免疫炎症细胞来源,可以用来成瘤并有助于反应背景细胞的募集。为此,本研究采用荧光定量、共聚集显微镜、免疫细胞与免疫组织化学、⒐才嘌笛椤、流式细胞术、体内成瘤的方法,首先观中文摘要Ⅱ
织化学检测眦与橹腞鞍妆泶锴榭觯琁软件分析阳性细黜蝌赾形成中的作用。细胞株赴碌鰿蚯昂雖睬腡的表达,与.、雖细胞培养,观察细胞的形态;提同时检测在类人疪赴鹠细胞的表达,进行同源/悄虿∈蠼又中纬梢浦擦觯云诨竦檬笤葱缘脑缙诶嗳薱模型。目的鄄鈉和赴傲鲎橹疪谋泶锏那榭觯冉戏治觳釮赴闘赴系鰿蚯昂与.⑹∧P停鄄馔周血分泌水平。冉蟤类人疪赴暝型糖尿病/蠛驼痗小鼠中成瘤情况,观测外周血中分泌水平。方法瓾虳中表达的检测细胞株与赴闛...赴邢胞培养,观察细胞的形态,提取ü舛考觳釸的表达,共聚集显微镜检测细胞内蛋白的表达,免疫细胞化学检测细胞、免疫组胞光密值数据,酶联免疫吸附实验觳庀赴置诘腞鞍祝培养实验观测分泌的对的趋化作用。甊隒甂藕磐返墓叵取ü舛考靑的表达;共聚集显微镜检测细胞狢鞍椎谋泶铮籈检测细胞鞍椎姆置冢博士学位论文、
细胞,两者相比较均有统计学差异牛籧组织中的表达高速度;取瘤组织做染色观察病理学形态、免疫组化检测騎的表达;肿型糖尿病/∈罄郒P偷墓菇瓾虳中的表达.、隣.、隣.,检澳蚿鞍椎谋泶铩瓸痚小鼠吞悄虿∧P偷慕⒓巴庵苎猂鞍椎募觳将只雄性/∈笏婊治狝、、淖椋孔唬珹组采用一次性腹腔注射珺组采用一次性腹腔注射与榈攘课蘧仕峄冲液,椴捎次腹腔注射,椴捎糜隒组等量无菌柠檬酸缓冲液分胃骨蛔⑸洌嗖獠煌钡憧崭寡L潜浠、四组均自由饮食。用流式细胞术检测糖尿病鼠与正常鼠外周血赴珽检测糖尿病鼠与正常鼠外周血蛋白的分泌情况。将类人疪赴赴经尾静脉注射接种吞悄虿/蠛驼痗⑹蟾唬鄄於锍闪鍪奔洹⒊闪雎省⒘鎏迳瘤组织进行原代培养,觳庠靥宓恼希涣魇较赴羌觳獬闪鎏悄虿鼠与未成瘤糖尿病鼠外周血赴谋壤籈检测成瘤糖尿病鼠与未成瘤糖尿病鼠外周血蛋白的分泌情况。结果設为对照,、蚈赴腞表达水平分别是甃的....倍,.