文档介绍：福建医科大学
硕士学位论文
RNA干扰介导Prohibitin基因沉默对人大肠癌细胞株生物学特性
的影响
姓名:程艳洁
申请学位级别:硕士
专业:病原生物学
指导教师:姚丽君
20100301
扇沤榈糚虺聊匀舜蟪Π┫赴生物学特性的影响中文摘要对靶基因杓频膕三个特异性片段、、,以脂质细胞的生长;通过平板克隆和软琼脂克降形成实验检测目的:利用扇际酰匾煨猿聊琍基因的表达,研究蚨源蟪Π┫赴鲋场⒌蛲龊拖赴芷诘牡鹘谧饔茫T用技术治疗大肠痛的可行性奠定理论和实验基础。方法:以检测诙嘀甏蟪Π┫赴曛斜泶铮秆〕龈弑泶鞍紫赴辏愿弥晗赴Q芯慷韵螅诔境ぷ刺己们榭鱿滤彩弊H菊体T靥澹H舅秆〕龅拇蟪Π┫赴辏∈焙螅ü比较基因沉默后蛋白的表达,筛选出干扰效果最明显的两个片段,设立阴性对照和筛选出的两个挝J笛樽椋匦伦H靖弥甏蟪Π┫赴种瓢谢泶铮ü⑵桨蹇寺⌒纬墒笛椤⑷砬碇寺⌒纬墒笛榈燃觳细胞增嫡能力。在奥沙利锦药物诱导基础上,通过和魇角共庀赴期:;瓼约梁虷染色荧光显微镜观察,记录细胞典型凋亡形念和细胞核改变。结果:结果显示鞍自谄咧甏蟪Π┫赴芯斜泶铮以斜泶镒罡摺0邢騊特异性化学合成片段,瞬时转染后,三个片段均明显抑制蛋白表达,且片段、抑制效果更好。细胞增殖能力检测结果,法绘制细胞生长曲线发现转染聊琍基因后可抑制对细胞体外成瘤能力的影响,发现转染后赴寺∈可儆谝跣远哉组,平板克隆形成率分别为士%、土%、%;软琼脂克隆形成率..%‰、..%。,且干扰组与对照差异有统计学意义。通过细胞周期分析,发现转染沉默赴骃期细胞比例下降,凋亡峰
升高,诒壤齆..ァ..%、.%;应用狥赴蛲鍪约梁辛魇郊觳庖餐⑾諨允镜蛲鱿胞比例增加,..、瓼虷染色均在荧光显微镜下观测有明显的凋亡现象,且凋亡比例和强度比阴性对照强。结论:靶向畇干扰可以有效的沉默大肠癌细胞颍碌鞍姿剑佣种拼蟪Π┫赴鲋场⒋俳蟪Π┫赴蛲觯皇笛樯秆〕沉默效果较好的两个片段、实验组,为后期丌展迥诟扇实验提供理论、技术基础;靶向干扰蛭4蟪Π┗蛑瘟蒲芯刻峁├砺依据。关键词:扇.:.,.士
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导师签名。手弓,:∑、使用学位论文的规定,同意学校保阅。本人授权福建医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位沦文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ学位论文原创性声明本人郧唾声明:所坏难宦畚模潜救嗽诘际Φ闹傅疾,独立进行研究鹤魉〉的真实成果。除文中已注明引川的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本论文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识剑本声明的法律结果由本人承担。作者签名中:学位论文版权使用授权书签者日
个氨基酸不綢酸结构非常保守,且分布非常广泛,鞍锥喙δ苄浴篎是与它多种定位密切基因被命名,魑O吡L宸肿影槁碌墓δ芤丫玫焦惴喝峡桑职┑鞍椎功能尚不明确,且存在争议,等⋯】发现基因蛋白质表达谱,发现雄激素介导的前列腺癌组织中春衔锏谋泶锵碌鞒大肠癌是危害世界人民健康的常见恶性肿瘤之一,大肠癌在世界全部恶性肿瘤发病中,男性中第二位,女性中为第三位【,在我国最常见的恶性肿瘤中排名第血位,随着人民生活水平的提高和饮食方式西化,大肠癌的发病率居高不下并呈明显上升趋势】。从分子生物学角度,恶性肿瘤可视为基因疾病,它包括癌基因的激活和抑癌基因的失活,现在已经发现了多种可独立影响癌症疗效和预后的生物因子,为肿瘤的预后和早期治疗提供更为广阔的研究领域,也为基因治疗打下峰实的理论基础。蚬惴