文档介绍：4 3 二○○九年·第五期研究报告 HPLC 检测苦参中苦参碱和氧化苦参碱的含量黄华树 1 叶能胜 1 郝晓丽 1 刘妮 1 谷学新 1 * 范国强 2 (?北京? 100048) (?北京? 100011) 摘?要?建立 H P L C 法测定苦参中苦参碱和氧化苦参碱含量。色谱柱采用 A i c h r o m N H 2 ( 2 5 0 × 4 . 6 m m , 5 μ m ) , 流动相为乙***- 乙醇- 3 % 磷酸溶液( 8 0 ∶ 1 0 ∶ 1 0 ) , 流速: 1 . 0 m L / m i n , 检测波长: 2 1 0 n m , 进样量为 1 0 μ L , 柱温: 3 0 ℃。苦参碱在 0 . 5 ~ 1 0 μ g / m L 范围内有良好的线性关系( r = 0 . 9 9 9 8 ) , 氧化苦参碱在 0 . 5 ~ 1 0 μ g / m L 范围内有良好的线性关系( r = 0 . 9 9 9 7 ) 。苦参碱平均加标回收率为 1 0 0 . 4 2 % ( n = 5 ) , R S D 为 1 . 9 1 % ; 氧化苦参碱平均加标回收率为 1 0 0 . 2 6 % ( n = 5 ) , R S D 为 2 . 0 3 % 。该方法操作简单、重现性好、检测灵敏度、准确度高, 且样品分离效果好。本方法适用于苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的含量测定。关键词?高效液相色谱法苦参苦参碱氧化苦参碱苦参是常用中药之一, 具有清热燥湿、祛风杀虫、利尿之功效, 为临床常用中药, 用于热痢, 便血, 黄疸尿闭, 赤白带下, 阴肿阴痒, 湿疹, 皮肤瘙痒疥癣麻风; 外治滴虫性***炎。苦参植物中主要含有生物碱、挥发油、黄***类化合物和脂肪酸。其中生物碱类的主要药效成分苦参碱和氧化苦参碱具有抗肿瘤、抗肝纤维化、抗乙肝病毒、对异常肝细胞凋亡的阻断、平喘和抑菌作用[ 1 , 2 ] 。高效液相色谱法( H i g h P e r f o r m a n c e L i q u i d C h r o m a - t o g r a p h y , H P L C ) 是中药质量控制研究中的常用方法[ 3 , 4 ] , 应用 H P L C 法测定苦参中苦参碱和氧化苦参碱的含量已有报道, 田娟[ 5 ] 等和汪文来[ 6 ] 等分别用高效液相色谱法测定不同产地的苦参中苦参碱和氧化苦参碱的含量, 灵敏度较高, 操作简单, 但是杂质干扰较大。为较好地控制该品种的质量, 本文参考《中国药典》方法, 对样品处理方法和色谱分离系统进行优化, 建立高效液相色谱法测定苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱含量的方法, 本方法简便, 快速、重现性好, 样品分离度好。 1?实验部分 ?仪器与试药 A g i l e n t 1 2 0 0 S e r i e s 高效液相谱仪( 美国 A g i - l e n t 公司) ; 苦参碱对照品( 批号: 1 1 0 8 0 5 - 2 0 0 5 0 7 ) 与氧化苦参碱对照品( 批号: 1 1 0 0 7 8 0 - 2 0 0 4 0 5 ) 均为中国药品生物制品检定所提供; 苦参药材购于同仁堂药店, 产地山西; 乙***为色谱纯, 水为超纯水; 其余试剂