文档介绍：摘要虫草素即煌蜒跸佘眨怯汲娌莸幕钚猿煞种唬畂近多年的研究发现虫草素有抑制肿瘤、抗真菌和增强免疫力的作用,已引起各国科学研究的高度重视。本研究课题以蛹虫草培养基残基为原料,系统深入研究了虫草素检测方法、提取纯化工艺、‘纯度鉴定及虫草素的抗肿瘤活性研究等。建立了虫草素高效液相色谱法,色谱标准曲线方程为:,线性相关系数严咝苑段#篛../,精密度及稳定性实验的小于ァ1痉ḿ虻タ焖伲娌菟啬芄淮锏胶芎玫姆掷胄Ч探索从培养基残基中提取虫草素的技术,优化了虫草素水提醇沉的工艺。得出最佳水提醇沉工艺条件:℃提取危弦罕任:,每次提取L崛∫号缩到废料量的叮砑倍量乙醇,醇沉时间为。虫草素水提液经过乙醇除杂后,杂质含量仍然很高,需要先对虫草素提取液进行初步分离。通过对盅衾胱咏换皇髦蔡匠娌菟氐奶匦越醒芯浚钪昭择髦糜诔娌菟氐拇执炕6匝衾胱邮髦琂进行热力学特征研究,研究结果表明,在温度~统娌菟刂柿颗ǘ确段冢焦谭吸附等温方程。热力学参数焓变,自由能变,髦虫草素的吸附是吸热过程,反应是自发进行的。影响阳离子树脂浇馕囊蛩赜辛魉佟⑽揭号ǘ取⒔馕号ǘ等,吸附柱最佳工作条件:流速/揭号ǘ./。解吸液为的氨水,解吸流速经过阳离子树脂某醪酱炕螅捎阴离子树脂进一步纯化,、法、紫外光谱、红外光谱等对获得的虫草素进行定性定量鉴定,确定其与标准品为同一种物质。以白血病细胞为阳性对照,研究了不同浓度的自制虫草素对小鼠肝癌细胞增殖的抑制作用。结果表明,虫草素对细胞和赴哂忻飨缘囊种作用,其抑制作用具有明显的剂量依赖性。值比较,得出细胞对虫草素的敏感性比赴俊关键词:培养基残基虫草素分离纯化白血病细胞株小鼠肝癌胞株疞/
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,篶福建师范大学张丽艳硕士学位论文;;/,.琲—瑄.;;
中文文摘蛹虫草是珍稀名贵的药食两用真菌,是虫草属模式种,含有丰富的营养物质。我国从上个世纪八十年代开始对蛹虫草栽培、化学成分和药理活性等进行研究,大量研究表明蛹虫草的化学成分与冬虫夏草的非常相似,可以作为冬虫夏草的代用品。最近随着人们对蛹虫草药理药效作用的认识,蛹虫草的需求量迅速增加。年月,蛹虫草被批准为新资源食品,更加促进了蛹虫草的发展。目前全国各地均有蛹虫草生产基地,其中许多企业产草量都在吨级以上。收获的子实体作为新型保健食品走上百姓饭桌,用来炒菜、煲汤、沏茶等,一部分被制成蛹虫草健康酒、虫草补肾酒、蛹虫草酸奶等大众消费品,还有一部分蛹虫草被制成具有特殊功效的药品。除收获子实体外,还得到大量的蛹虫草培养基残基,这些培养基残基中含有大量的虫草素,如果扔掉或者只做简单的利用,会造成资源的浪费。虫草素是蛹虫草的主要活性成分,大量研究证明具有抗真菌、抗病毒、抗肿瘤、增强免疫力等功效。但虫草素的价格昂贵,使其应用受阻。如果利用培养基残基提取虫草素,不仅可以降低虫草素的价格,还可以增加蛹虫草种植业的收入。本研究以蛹虫草培养基残基为原料,系统深入对虫草素分离纯化的整个工艺及其抗肿瘤活性进行研究。具体研究工作如下:娌菟丶觳夥椒ǖ慕使用法测定虫草素含量,将虫草素制成雠ǘ确直鹞#篛./虫草素标准品溶液,吸取不同浓度的标准溶液“垦次取平均值。以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标作图得虫草素的回归方程为:..瑀.。通过精密度试验、稳定性试验、回收率试验验证此法能够达到很好的分离效果,结果准确可靠。娌菟氐乃岽汲凉ひ通过单因素试验和正交试验考察了温度、提取次数、料液比、提取时间对虫草素提取率的影响。得出最佳提取工艺条件:℃提取危弦罕任:,每次提取。以杂质量和提取液中虫草素的含量为指标,考察了乙醇的添加量、提取液浓缩倍数、醇沉时间等因素对除杂工艺的影响。得出最佳醇沉工艺参数为:提取液浓缩到废料量的叮砑倍量乙醇,嫦路胖小时后浓缩回收酒精。/,
‰弧素。实验分三次进行,累计从锱嘌谢刑崛〉,杂质含量仍然很高,如果要得到高纯度的虫草素需要先对虫草素提取液进行初步分离,虫草素属于弱碱性产物宜选用强酸性树脂来纯化。本研究对盅衾胱咏换皇髦蔡匠娌菟氐奈胶徒馕匦越醒芯浚选择出髦魑N匠娌菟氐淖钍适髦⒀芯苛似涠猿娌菟氐奈饺攘ρ性以及动态吸附、解吸的最适工艺条件。结果表明,虫草素在髦系奈焦程是吸热过程且自发进行的,在实际分离中,应采用高温吸附、低温解吸的方式。吸附柱最佳工作条件:流速/揭号ǘ./,解吸液为氨水,解吸流速娌菟鼐乒ひ经过虫草素的粗制后,%,但得到的洗脱液仍发黄。为了提高结晶质量,对虫草素一次过柱后的洗脱液进行精制。由于洗脱液呈碱性,且为了更好的除去杂质,我们选择阴离子树脂淳瞥娌慷却锏%,产率达到%。用āā⒆贤夤馄咨璺ā⒑焱夤馄