文档介绍：中国医药指南 2011 年 12 月第 9 卷第 35 期•实验研究• 315
蛹虫草子实体中多肽的提取分离及组成初探
宗静李竞*
(西南大学药学院,重庆 400716)
【摘要】目的获取蛹虫草子实体中的肽并对其分离纯化。方法采用水提醇沉法提取,葡聚糖凝胶色谱法分离纯化,继而用氨基酸自动分
析仪分析组成。结果由单因素考察和正交试验法确定了最佳提取条件,经分离纯化后得到两个小分子量的肽组分,分别测定出了两组分
的氨基酸组成及含量。结论分离出的肽类组分氨基酸种类丰富齐全,具有一定的营养和药用价值。
【关键词】蛹虫草;子实体;肽;提取分离;组成
中图分类号: 文献标识码:B 文章编号:1671-8194(2011)35-0315-02
蛹虫草[Cordycepsmilitaris(L.)Link]又名北冬虫夏草,与冬虫夏同量的无水乙醇沉淀,静置24h,离心(4000 r/min)15 min得上清,
草同属异种。研究表明二者具有极相似的有效成分和作用[1]。所以很水醇溶物即为肽类物质。
多人都认为蛹虫草可以作为冬虫夏草的替代品[2,3]。张显科等[4]对蛹虫 肽类物质含量的测定方法
草子实体中的化学成分进行全面的测定分析,结果表明其中含有蛋白采用紫外吸收法[7]测定水醇溶物中肽类物质的含量,将粗提液稀
质、脂肪、虫草酸、虫草素、虫草多糖、SOD酶以及一些微量元素, 释十倍测得。
充分证实了蛹虫草的营养和药用价值。多肽是机体完成各种生理活性 单因素实验设计
必不可少的一种物质,在生物的代谢活动和疾病治疗中起着不可取代分别以提取温度、时间、料水比、pH、水醇比做单因素实验,确
的作用,因此该研究现已成为一大热点[5],但纵观目前国内外的研究定不同提取条件下多肽的提取量。
报告,关于蛹虫草蛋白多肽类的报道却并不多,本实验通过正交试验 正交实验设计
法优化了蛹虫草子实体活性多肽提取的工艺条件,通过葡聚糖凝胶柱根据单因子实验,用正交实验考察优化其中三个因素:料水比、
层析法分离纯化出含有丰富氨基酸的活性多肽,为蛹虫草中蛋白多肽 pH和水醇比,实验设计见表1。
类物质的研究应用提供理论依据。
表1 正交实验因素水平表
1 材料与仪器因素
实验材料水平 A 料水比(w:v) B pH C 水醇比(w:v)
蛹虫草子实体,Sephadex G-100,Sephadex G-25,无水乙醇,磷 1 1:10 7 1:1
酸二氢钠,磷酸氢二钠,氢氧化钠等。 2 1:12 8 1:
3 1:14 9 1:2
主要仪器
FA2004型电子天平,TD3低速离心机,UV-1800紫外分光光度计, 肽类物质的分离[8]
恒温水浴锅,FZ02粉碎机,日立L-8800型氨基酸分析仪,HL-2S 恒流蛹虫草子实体的肽类物质采用两步凝胶色谱法分离,将提取所得
泵;紫外检测仪,RE-52型旋转蒸发仪,pHS-3C 型精密酸度计等。的水醇溶物按一定比例浓缩,上样于Sephadex G-100柱分析,后将收
2 实验方法集的洗脱液浓缩至小体积再上样于Sephadex G-25柱分析。两步葡聚糖