文档介绍：紫外—可见光谱实验报告姓名:张瑞芳班级: 化院 413 班学号: 2013E8003561147 培养单位:上海高等研究院指导教师:李向军实验日期: 2013 年 12月4日 1 一、实验目的 1、学会使用 UV-2550 型紫外- 可见光分光光度计。 2、掌握紫外—可见分光光度计的定量分析方法。 3、学会利用紫外可见光谱技术进行有机化合物特征和定量分析的方法。二、实验原理基于物质对 200-800nm 光谱区辐射的吸收特性建立起来的分析测定方法称为紫外—可见吸收光谱法或紫外—可见分光光度法。紫外—可见吸收光谱是由分子外层电子能级跃迁产生,同时伴随着分子的振动能级和转动能级的跃迁,因此吸收光谱具有带宽。紫外—可见吸收光谱的定量分析采用朗伯- 比尔定律, 被测物质的紫外吸收的峰强与其浓度成正比, 即: 其中 A 是吸光度, I、 I 0 分别为透过样品后光的强度和测试光的强度, ε为摩尔吸光系数, b 为样品厚度, c 为浓度。紫外吸收光谱是由于分子中的电子跃迁产生的。按分子轨道理论, 在有机化合物分子中这种吸收光谱取决于分子中成键电子的种类、电子分布情况, 根据其性质不同可分为 3种电子:( 1) 形成单键的σ电子;( 2) 形成不饱和键的π电子;( 3)氧、氮、硫、卤素等杂原子上的未成键的 n 电子。图 1. 基团中的σ, π, n 成键电子当它们吸收一定能量ΔE 后,将跃迁到较高的能级,占据反键轨道。分子内部结构与这种特定的跃迁是有着密切关系的,使得分子轨道分为成键σ轨道、反键σ* 轨道、成键π轨道、反键π* 轨道和 n 轨道,其能量由低到高的顺序为: σ<π<n< π*< σ*。 2 图 2. 分子轨道中的能量跃迁示意图仪器原理是光源发出光谱, 经单色器分光, 然后单色光通过样品池, 达到检测器,把光信号转变成电信号,再经过信号放大、模/ 数转换,数据传输给计算机,由计算机软件处理。三、仪器与溶液准备 1、 UV-2550 型紫外—可见分光光度计 2、 1cm 石英比色皿一套 3、 UVprobe 电脑软件 4、配置好的 10μ g/mL 、 15μ g/mL 、 20μ g/mL 以及未知浓度的***紫溶液,***红溶液 5、仪器的基本构成: 紫外可见分光光度计的基本结构如下: 光源→单色器→吸收池→检测器→信息处理与显示系统四、实验步骤 1、打开电源, 开启紫外—可见分光光度计上的开关, 打开电脑上的 UVprobe 软件, 让其自检,约 5min 后, 对仪器相关参数设置。设置波长范围为 710-365nm ,高速检测,间隔为。 2 、空白对比实验。取一定量的蒸馏水装进 1cm 石英比色皿至 2/3, 在 Win-UV 主显示窗口下, 单击所选图标“基线”以扫描蒸馏水的测定吸收曲线。 3 、分别用取 10μ g/mL 、 15μ g/mL 、 20μ g/mL 的***紫溶液装进石英比色皿中放到紫外—可见分光光度计中,获得波长- 吸收曲线,读取最大吸收的波长数据和吸光度( 每次测量完成后注意保存数据)。得到其标准图谱。 4 、同样的方法测定未知浓度的***紫溶液的最大吸收波长数据。并与标准图谱相对照。 5、用同样的方法以乙醇为空白对比溶剂测***红的最大吸收波长数据。 6 、数据处理和分析。 7 、结果与讨论。样品 3 五、实验数据处