文档介绍：1沙门氏菌总DNA和质粒的提取选择培养18h的菌液,采用天根生化科技有限公司细菌基因组DNA提取试剂盒和质粒小提试剂盒提取。2多重PCR优化条件设计Mix、引物浓度、■GCtetG761CTGCTGATCGTGGGTCTTGAGCTTGGAAGATCGCATGTGTTflor力9GGTG/TTGCGTATAATB-AGAGCaadA1 GACAACATTTCTAaac(3)-TCTGAaph(3)-GAAGTGCTTCTCAAGA试剂使用量(uL)BufferMIX(已加MgCl2)()2引物1(lOumol/L)(lOumol/L)(5u/uL)°C 5min94°C 30s t60°C30sk3572°C 30s 丿72°C lOmin安徽省部分猪场生猪沙门氏菌带菌情况与咐药性研究(动物源沙门氏菌耐药性及质粒介导嗤诺***类耐药基因的流行病学研究)沙门氏菌invA基因的PCR鉴定[66]引物F:GCTCAGTATTGAGG引物R:GTGGCATGTCTG质粒介导卩奎诺***类耐药基因qnrA516[81]qnrA-AGGATTTGqnrA-RGATCGGCAAAGGTTAGGTCAqnrB469(qnrB2亚型基因序列号:EU643617)[81]qnrB-AGAAAGGqnrB-qnrS417 ⑻]qnrS-FACGACATTCGTCAACTGCAAqnrS-TGTAGGCqnrC447 [24]qnrC-FGGGTTGTACATTTATTGAATCqnrC-ACTTTACGAGGTTCTqnrD468 门3]qnrD-FTTACGGGGAATAGAGTTAqnrD-AATaac(6Z)-Ib482 [82]aac(6z)-Ib-FTTGCGATGCTCTATGAGTGGCTAaac(6,)-Ib-TGGCGTGTTTqepA570 [83]qepA-FCCAGCTCGGCAACTTGATACqepA-AGAAAAoqxA(Genbank序列号:FN811184)670[52]oqxA-FGATCAGTCAGTGGGATAGTTToqxA-RTACTCGGCGTTAACTGATTAoqxB(Genbank序列号:FN811184)512[53]oqxB-GGCGGGAAGTACoqxB-ATTTTGGCGCGTAPCR反应体系组分用量(uL)(uL)引物F1引物R1lOXTaqBuffer(Mg加)5dNTP()4TaKaRaTaq(5U/uL):95°ClOmin°C45s53°C45s72°Clmin72°ClOminqnrC°C5min94°C 35s5O°C30s72°C45s72°ClOminqnrD95°C5min°C35s55°C35s72°C40s72°ClOminaac-Ib°