文档介绍：西北师范大学
硕士学位论文
匙萼木中蒽醌类化合物体外抗肿瘤活性研究
姓名:周启银
申请学位级别:硕士
专业:细胞生物学
指导教师:丁兰
2009-06
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西北师范大学匙萼木中蒽醌类化合物体外抗肿瘤活性研究周启银
摘要
蒽醌化合物具有抗氧化,抗炎,抗菌,抑制肿瘤细胞生长,诱导肿瘤细胞凋
亡等生物学特性。匙萼木(Xanthophytum Attopvensis Pierre)为茜草科(Rubiaceae)
匙萼木属(Paedicalyx)植物,产于广东、海南、云南等地,民间作药用,主要用于
治疗黄疸肝炎,含有 8 种蒽醌化合物。
本研究用 SRB 法检测了从匙萼木中分离得到的 6 种蒽醌化合物对 4 种人肿
瘤细胞株(HepG2,SGC-7901,Glc-82,HL-60)的体外细胞毒活性,并且对它
们的构效关系进行了分析;利用生长曲线法、彗星分析、流式细胞术及 AO/EB
双染法,分别检测了蒽醌化合物虎刺醛对人早幼粒白血病细胞 HL-60 的生长抑
制作用,DNA 损伤能力,对细胞周期的阻滞作用及诱导细胞凋亡作用;检测了
虎刺醛对人肝癌细胞 HepG2 的生长抑制、细胞迁移能力及细胞骨架的影响。研
究结果如下:
(1) 未有糖基取代的 1,3-二羟基-2-醛基蒽醌(化合物 1)和 1-甲氧基-2-
醛基-3-羟基蒽醌(化合物 2)对 4 种细胞株均显示了较强的细胞毒活性,比具有
糖基的蒽醌化合物的细胞毒活性高约 - 倍,这可能缘于糖基取代基较大的
空间位阻使得化合物与细胞中靶分子的相互作用减弱所致;仅有C-1 位取代基不
同的化合物 1(-OH)和化合物 2(-OCH3)具有相似的细胞毒活性,表明该取代
位点的-OH和-OCH3对化合物的细胞毒性贡献相似;与其它 3 种细胞株相比,
HL-60 细胞株比其余 3 种贴壁细胞对蒽醌化合物有更高的敏感性,前者的IC50值
比后者低 - 倍。
(2) 虎刺醛对人早幼粒细胞HL-60 具有时间及浓度依赖性的生长抑制和诱导
细胞DNA损伤的作用,与对照组相比,药物处理组(5-µg·mL-1)均引起了极显
著性(P<)的彗星率。5,10, 及 15µg mL-1 虎刺醛在 12-60 小时时诱导
HL-60 细胞G1 期周期阻滞,30µg mL-1 虎刺醛在 12-60 小时时诱导HL-60 细胞S
期阻滞,40µg mL-1 虎刺醛在 12-60 小时时诱导HL-60 细胞G2/M期阻滞;药物诱
导的HL-60 细胞凋亡存在时间及浓度依赖性关系,并 -µg·mL-1的药物在
72 小时范围内诱导的细胞凋亡率均达到显著水平(P<)或极显著性水平
(P<)。
(3) 虎刺醛对人肝癌细胞HepG2 的生长有很强的抑制作用,呈时间及浓度
依赖性;虎刺醛对HepG2 细胞的迁移抑制作用也呈现时间及浓度依赖性。处理
组细胞应力纤维变短消失,细胞贴壁性减弱并变圆,并发生凋亡。4-20µg·mL-1虎
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西北师范大学匙萼木中蒽醌类化合物体外抗肿瘤活性研究周启银
刺醛诱导的细胞凋亡率在 24h,48h和 72h与对照组比均为极显著性差异
(P<)。
实验结论如下:
(1) 根据 NCI 指南,6 种蒽醌化合物中化合物 1 和化合物 2 具有进一步研究
的价值。另外,由于被试化合物 3-6 均为 C-3 糖基取代,至于是否所有糖基取代
均产生细胞毒活性降低,还需进一步证实。
(2) 虎刺醛对 HL-60 细胞显示出了很强的抑制性及诱导凋亡作用,因此可
被视为一种潜在的抗白血病的药物。
(3) 虎刺醛诱导的细胞骨架变化使 HepG2 贴壁性减弱、细胞变圆并抑制细
胞迁移从而进一步诱导细胞凋亡,但其具体作用机制需在后面进一步研究,为虎
刺醛作为一种潜在的抗肝癌药物提供更加可信的证据。
关键词:匙萼木;蒽醌化合物;细胞毒活性;构效关系;虎刺醛;DNA 损伤;
凋亡;细胞迁移;细胞骨架
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西北师范大学匙萼木中蒽醌类化合物体外抗肿瘤活性研究周启银
Abstract
The biological properties of anthraquinones include antioxidation,
antiinflammatation, antibacterial, antiproliferation of tumor cells and induction of
apoptosis. Xanthophytum Attopvensis Pi