文档介绍：山西医科大学
硕士学位论文
类风湿关节炎患者CD4+CD25+T细胞FOXP3基因启动子区甲基化水
平研究
姓名:耿晔
申请学位级别:硕士
专业:风湿免疫学
指导教师:刘秀梅
2011-05-05
山西医科大学硕士学位论文
类风湿关节炎患者 CD4+CD25+T 细胞
FOXP3 基因启动子区甲基化水平研究
摘要
目的:
检测类风湿关节炎(RA)患者外周血 CD4+CD25+调节性 T 细胞 FOXP3 的表达,研究
FOXP3 基因启动子区甲基化水平,探讨其在 RA 发病中的作用。
方法:
按入组标准收集 RA 患者 25 例,其中包括初发活动组 RA 患者(16 例)和非活动组
患者(9 例),以健康体检者(n=25)为对照。用 DAS28 方法评价 RA 临床疾病活动度。
以流式细胞术测定外周血 CD4+CD25+T 细胞 FOXP3 的表达。采用密度梯度离心法分离 RA
患者组和对照组外周血单个核细胞,应用免疫磁珠法分选 CD4+CD25+T 细胞及重亚硫酸盐
处理测序法检测 RA 患者与正常人 CD4+CD25+T 细胞中 FOXP3 基因启动子序列甲基化水
平的差异。
结果:
1 . 流式细胞仪分析显示,活动组和非活动组 RA 患者以及正常对照组
CD4+CD25+FOXP3+T 细胞表达百分率分别为 %±、%±、%±,
CD4+CD25+FOXP3+T 细胞表达百分率在 RA 活动组和非活动组患者比正常对照组显著减少
(p<)。
RA 患者 CD4+CD25+FOXP3+T 细胞表达百分率与 DAS28 评分呈负相关。
患者 CD4+CD25+T 细胞 FOXP3 启动子区甲基化水平高于正常对照组,结果有
统计学意义(P<)。
结论:
,RA 患者外周血中 CD4+CD25+FOXP3+T 细胞表达百分率明显
降低,说明 RA 患者外周表达 FOXP3 的调节性 T 细胞比例下降,参与 RA 的发病,并且与
疾病的活动度有关。
患者 CD4+CD25+T 细胞 FOXP3 基因启动子区-67、-74 位点甲基化水平较正常
对照组升高,提示启动子区甲基化水平可能与 RA 的发病有关,因此针对此机制设计出有
效的干预手段,为类风湿关节炎的治疗提供了新的理论基础。
关键词:类风湿关节炎;CD4+CD25+FOXP3+调节性 T 细胞;重亚硫酸盐测序法

II
山西医科大学硕士学位论文
Detect the methylation status of the FOXP3 gene promoter in
CD4+CD25+T cell of patients with rheumatoid arthritis
Abstract
Objective:
To detect the expression of foxp3 on CD4+CD25+ regulatory T cell in peripheral blood of
patients with rheumatoid arthritis,and to detect the methylation status of the FOXP3 gene
promoter in peripheral blood CD4+CD25+ regulatory T cell of patients with rheumatoid arthritis
and its role in the pathogenesis of RA.
Method :
25 RA patients and 25 healthy controls were recruited according to the collection standard,
which include 16 new-onset patients with active RA and 9patients with inactive disease
activity was measured by the of FOXP3 in CD4+CD25+T cell assay was analyzed
by flow cytometry. PBMCs of RA patients and healthy controls were isolated by Ficoll-Hypaqu