文档介绍：1
研究生签名:咭学位论文独创性声明学位论文使用授权声明蜂一吖殴一汀急一沙⒈韭畚氖俏腋鋈嗽诘际χ傅枷陆械难芯抗ぷ骱腿〉玫难芯砍⑵渌径员狙芯克龅墓毕拙言诼畚闹凶髁松鞑⒈硎玖诵本人郑重声明:⒓岢忠浴扒笫怠⒋葱乱坏目蒲Ь翊邮卵芯抗ぷ鳌⒈韭畚闹谐耐猓惺笛椤⑹莺陀泄夭牧暇钦媸档摹⒈韭畚闹谐暮椭滦坏哪谌萃猓话渌嘶蚱渌挂丫发表或撰写过的研究成果。意。研究生签名:期:本人完全了解南京师范大学有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版;有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅;有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索;有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。果。日.
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摘要类风湿关节炎琑是一种以慢性关节滑膜炎为主要特点的自身免疫性疾病,目前认为抗原驱动及赴榈际荝⒉〉墓丶蛩兀泄仄确切发病机制仍未完全明确,因而尚无满意的诊断方法和治疗药物。近年来蛋白质组学技术的飞速发展,为研究的发病机制和发现早期诊断的分子标记物提供了科学依据。,.治鯮颊哂胪饪拼瓷嘶颊吖亟诔上宋膜细胞現鞍字时泶锊钜欤Q罢襌噝亟诨ぬ异性表达蛋白、的早期诊断、药物靶点筛选及发病机制探讨提供可靠的实验研究依据。由于健康人滑膜组织难以获取,本实验中采用外科创伤患者作为对照组。取自经手术切除的患者和外科创伤患者的滑膜组织,采用胶原酶和胰酶结合消化法分离培养庖呦赴Ъ‵内波形蛋白谋泶铩Q∮~呀庀赴竦孟赴艿鞍祝珺舛ǖ鞍字逝ǘ龋掷隦者及对照组艿鞍字剩壕鞠陨ê虸图像软件分析凝胶图谱,从凝胶中切取差异蛋白质斑点,,,用查询软件搜索数据库鉴定蛋白,初步分析某些蛋白质在械墓δ埽⒍圆糠植钜斓鞍字实憬蠾验证。光学显微镜下可见,培养的仕笮位蛑危郊ò幌赋ぃ┒硕嘤肓诮细胞连接并交织成网状,呈现极向排列或涡旋生长。细胞核呈卵圆形,位于细胞中央,核仁明显。免疫细胞化学染色结果显示诔蕍粜苑从Γ粜韵赴率达%以上,符合成纤维细胞的特征。患者和对照组计追直鹣允境龅鞍字实恪6远相互匹配的蛋白质点进行差异分析,以差异量大于兜谋泶锪课W迹醪缴秆〕个差异表达的蛋白质斑点,其中中表达上调和高丰度表达的蛋白有个,下调表达的个。,成功鉴定出个点,其中有龅鞍字史肿樱缙咸烟堑鹘诘鞍珺┐蓟猠,、核纤层蛋白瓵/琇、过氧化物还原酶,、谷胱甘肽转移酶珿⒌
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其中荝阎5淖陨砜乖碛鍪潜狙芯啃路⑾值木哂星痹谟τ眉壑档分子标记物。根据数据库提供的信息,对鉴定的蛋白质按功能进行初步分类,主要涉及:①参与物质代谢或能量产生的生物酶类,如肿瘤型丙酮酸激酶畃,.【.虎谙赴藕抛5嫉鞍祝缒ち5鞍③细胞结构蛋白,如瓵/;④分子伴侣,如葡萄糖调节蛋白珿琣宓琀虎菁俣ɑ蛭粗5鞍祝鏟,。为进一步证实差异蛋白在中的特异表达,/、.,运用技术对及对照组猩鲜龅鞍点的表达水平进行检测,证实这些差异蛋白均在谐噬仙泶锘蛱匾毂泶铮从而验证了结果的准确性。以上研究结果提示,患者与对照组浯嬖诓钜毂泶锏牡鞍字剩砻鱎的发生是一个多种蛋白质分子参与的复杂过程。这些差异蛋白有可能构成关节滑膜的相关自身抗原,在诱导自身免疫反应中发挥一定作用。关键词:类风湿关节炎;成纤维样滑膜细胞;蛋白质组,二维电泳,Ⅱ
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