文档介绍：。:基因工程的操作,是在分子水平上的操作,依赖一些酶作为工具对基因进行人工切割,拼接和扩增等操作,所以把这些酶称之为“工具酶”。,是一类能识别双链DNA分子中特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。::两条链上断开的位置是交错的对称地分布在识别序列中心位置两侧,:来源不同,::识别序列相同,:识别序列不同,,其限制酶的特异性发生松动,识别和切割序列发生改变,这一特性称为星号活性。:可使一段DNA的3`羟基末端和5`磷酸末端形成3`,5`-磷酸二酯键,把两个DN***段连在一起,封闭DNA双链上切口的酶。:在引物和模板存在下,把脱氧核糖单核苷酸连续的加到双链DNA分子引物链的3'-OH端,催化核苷酸的聚合作用。12.?G值:是指DNA双链形成所需的自由能,该值反映了双链结构内部碱基对的相对稳定性,△G值越大,则双链越稳定。:PCR反应过程中,随着PCR产物的逐渐积累,被扩增的DN***段不再呈指数增加,而进入线性增长期或静止期,即出现“停滞效应”。:测定目的基因在样本中的拷贝数(必须使用已知拷贝数的绝对标准品,必须做标准曲线):测定目的基因在样本中的含量的相对比例,::有一定同源性的两条核酸单链,在适宜的温度和离子浓度等条件下,通过碱基互补退火形成稳定的双链分子的过程。:核酸探针是指用放射性核素、生物素或其他活性物质标记的,能与特定的核酸序列发生特异性互补的已知DNA或RN***段。:将DNA、RNA或蛋白质固定到固体支持物上的过程。:利用毛细管原理将DNA电泳带转移到膜上。也称Southern印迹。:电泳转移的对象是RNA,也称Northern印迹。精选资料,欢迎下载。:指将待测核酸序列片段结合到一定的固相支持物上,然后与存在于液相中标记的核酸探针进行杂交的过程,是目前最常用的一种核酸分子杂交方法。这种膜上印迹杂交的技术也称印迹技术。:携带外源目的基因或DN***段进入宿主细胞进行复制和表达的工具称之为载体,其本质是DNA(少数为RNA)。:也称为多位点接头,是指载体上人工合成的一段很短的含有紧密排列的多种限制性核酸内切酶的酶切位点的DN***段lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的互补:是指--半乳糖苷酶阴性的突变体之间实现互补。::指两个不同的基因或基因片段连接在一起,使用同一个启动子进行翻译,而且二者直接没有终止子,结果翻译后,两个不同的蛋白就连在一起,:表达载体的多克隆位点上有一段融合表达标签(Tag),表达产物为融合蛋白,方便后继的纯化步骤或者检