文档介绍：实验4 血清γ-球蛋白的提纯Purificationofserumγ-globulin实验思路蛋白质的理化性质有哪些?蛋白质的分离方法有哪些?本次实验利用了哪个性质?、凝胶层析、透析法分离纯化蛋白质的基本原理及操作;;;分离蛋白质的方法分离方法沉淀法盐析法有机溶剂沉淀法层析法电学法电泳法等电聚焦超速离心法离子交换层析吸附层析凝胶过滤(分子筛)亲和层析定义:加入大量中性盐以破坏蛋白质的稳定因素并使从溶液中沉淀析出的现象。原理:破坏蛋白质两个稳定因素:水化膜和电荷层中性盐:(NH4)2SO4、Na2SO4、NaCl等。优点:蛋白质不变性,常用。(一)盐析法【实验原理】(二)层析法待分离物质(流动相)经过一个固态物质(固定相)时,根据溶液中待分离物质颗粒大小、电荷多少及亲和力等,使待分离蛋白组分在两相中反复分配,并以不同流速流经固定相实现分离。凝胶层析法定义:利用半透膜把大小分子分开的方法。材料:特制的半透膜,截止分子量一般为一万。(三)透析法临床应用:血液透析(四)离心技术离心技术是将含有微小颗粒的悬浮液置于离心转子中,利用转子绕轴旋转产生的离心力将微小颗粒按密度或质量的差异将其分离的方法。沉降速度(v)指在强大的离心力作用下,单位时间内物质颗粒沿半径方向运动的距离。v=×10-4×D2(ρ-ρm)n2r/ηmD—颗粒直径ρ—颗粒的密度ρm—介质的密度ηm—介质粘度r—旋转半径(物质质点所处位置与旋转中心的距离)N—转子转速