文档介绍：三:鬻一主席;山大学生命善擎耄院,广州,。三成员:。柳’学槐涮灞泶锛捌湓诎┫赴驼O胞中的靶向研究中山大学硕士学位论文争导师:张擎副教授专业:生物化学与分子生物学姓名:邹尚利参
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中山大学硕士学撇邹尚利鼢突变体表达及其在癌细胞和正常细胞絮///⋯/疘//疕//疘//////疘/疘///疘学位论文作者签名:郐两和学位论文作者签名:乌媳縅论文原创性声明学位论文使用授权声明日期:年月日本人完全了解中山大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。的电子版和纸质版,有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆、院系资料室被查阅,有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索,可以采用复印、缩印或其他方法保存学位论文。日期:≯阥≥月’导师签名日期:加日
和正常细胞中的靶向研究专业:生物化学与分子生物学硕士研究生:邹尚利导师:张擎副教授摘要甋于年发现表皮生长因子,,已有的研究表明ü肫浒邢赴ど鲜芴宓慕岷希俳し簟⒔悄ぁ⒎魏推苌皮组织等的增殖和分化;对表皮损伤和溃疡具有良好修复功能;临床上对肠、胃、肝等器官表面损伤的修复和再生也有显著疗效。因此在医疗、美容领域有非常广阔的应用前景。在本实验室之前的研究中,通过易错蚐姆椒ǘ訣进行了定向进化,并从定向进化文库中筛选获得了一个耐槐涮錏猛槐涮寰哂比更高的受体亲和性。为使获得的槐涮寤竦酶玫挠τ眉壑担⑸入的研究峁褂牍δ艿南嗷ス叵担究翁飧軪的特点选择毕赤酵母表达系统对兴苄员泶铩=ú淮昵┑腅蛲ü湍副泶镌靥錺在毕赤酵母屑状加盏急泶铮秆』竦靡恢昴康牡鞍妆泶锪扛叩木瓻疓,蛋白表达量为疞。然后利用疏水层析纯化目的蛋白。在获得了较纯的目的蛋白后,以标准品作为对照,在细胞水平检测目的蛋白的活性。首先通过细胞增殖实验发现,在作用浓度及时问维度相对于标准品对正常细胞有更强的促增殖能力,另外,通过集落形成实验发现不及对肿瘤细胞的促增殖能力。然后,借助划痕实验发现比有更强的促进小鼠成纤维细胞迁移的能力,但是它们对肿瘤细胞的迁移能力的促进能力要显著弱于正常细胞。Ⅱ
与此同时,利用毕赤酵母表达系统表达带有腅鞍祝柚鹗趄合亲和层析方法纯化目的蛋白,然后通过竞争性抑制治隽薶和竞争性结合的情况,并评估了其的关系,。此外,通过双分子荧光互作实验证实了.,秸咴诨钕胞体内的相互作用,其中荧光呈团状聚集分布,主要位于梭型细胞的一极或圆形细胞的近膜端区域,并且我们发现淖饔靡8恳恍关键词:表皮生长因子,酵母表达系统,竞争性结合,双分子荧光互作,迁移中山大学硕士学位论文邹尚利槐涮灞泶锛捌湓诎┫赴驼O赴械陌邢蜓芯
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第三章突变体幕钚约觳狻总结与展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯附录趼杂锉怼致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯