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分类号: 学号:20101622

医学硕士学位论文

相关高血压性脑出血 miRNAs
基因标记物的研究

学位申请人: 韩冰
指导教师: 王洪教授
学位类别: 医学硕士
学科专业: 外科学
授予单位: 河北大学
答辩日期: 二○一三年六月
Classified Index: CODE:10075
: NO: 20101624

A Dissertation for the Degree of M. Medicine

The Study on ic Markers of
miRNAs in Plasma of the Patients with
Hypertensive Cerebral Hemorrhage

Candidate: Han Bing
Supervisor: Prof. Wang Hong
Academic Degree Applied for: Master of Medicine
Specialty: Surgery
University: Hebei University
Date of Oral Examination: June, 2013
摘要
摘要
在我国,高血压性脑出血(Hypertensive intracerebral hemorrhage, HICH)的发病率
逐年增加,是世界上 HICH 高发的国家之一。HICH 由于其出血部位位于深部脑组织,
单纯手术治疗难以达到满意的效果,其致残率、致死率极高,给家庭和社会带来了沉重
的经济负担。近年来,如何有效的预测 HICH 的发生成为研究的热点,这就要求我们要
寻找到有效的分子标记物,对其在 HICH 的发病机制、靶向治疗和预后判断中可能起到
的作用进行深入研究。
微小 RNAs(microRNAs,miRNAs)是一类长度为 19-22 核苷酸(nt)的内源性的
非编码单链小分子 RNA,广泛存在于生物界。miRNAs 通过与靶 mRNA 3’UTR 区完全
或是部分互补结合,调控靶基因的表达,参与生物的生长过程,涉及骨骼、心肌、神经、
造血干细胞等组织器官的发育等生理及病理过程。
在人的体液中,包括血液、尿液、胆汁、脑脊液、腹水和胸水等,可以检测到循环
miRNAs。其来源为:①坏死和凋亡细胞的被动释放。②正常细胞借助微泡(microvesicle,
MVs)主动释放。在体液中,MVs 能够保护 miRNAs,使其免受 RNA 酶降解。我们在体
液中检测的 miRNAs 就是存在于 MVs 中的 miRNAs。
近期,关于脑梗塞 miRNAs 的研究取得一定进展,并且发现几个 miRNAs 在其发病
机制中起着重要的作用。到目前为止,尚无关于 HICH 血液循环 miRNAs 的研究进展。
我们前阶段研究显示,血液循环中的 miRNAs 可以作为监测疾病和预测其发生的指
标之一。因此,有必要寻找引发 HICH 的分子标记物,作为预测其发生的指标,并进一
步研究其在 HICH 发病机制中所具有的作用。
本研究对 HICH 血浆进行 miRNAs 表达谱分析,并初步验证 HICH 血浆特异性
miRNAs。将筛选出的特异性 miRNAs 用作 HICH 高危人群中筛选的早期分子标记物,
具有重大而深远的意义。同时,本研究后续将进行特异性 miRNAs 在 HICH 发病机制中
的作用和靶向治疗的相关研究。
第一部分 HICH 血浆 miRNAs 表达谱分析
目的:寻找 HICH 患者血浆中是否存在相关出血的 miRNAs 及有差异表达的 miRNAs
I
摘要
方法:抽取 12 例 HICH 患者和 12 例健康体检者外周静脉血,运用 RNA 抽提技术,获
取血中总 RNA。采用 Agilent 芯片技术进行 miRNAs 表达谱研究,用荧光定量 RT-PCR
技术初步分选。并用相关软件和统计学方法进行数据分析。
结果:在 HICH 患者周围血液中发现 7 个与出血相关的 miRNAs,且有显著差异性表达:
miRNA-16、miRNA-223、miRNA-19b、miRNA-107、miRNA-92a 和 let-7a 表达上调,
miRNA-1183 表达下调。
结论:发现高血压性脑出血病人外周静脉血中存在着与高血压性脑出血相关特异性的
miRNAs。
第二部分 microRNA 芯片结果的验证
目的:验证 HI