文档介绍：卜三个普鲁兰酶基因的克隆表达、:
指导教师签名:,:昏子奇论文作者签名:.琏毳己枣电子邮箱:枇亨煲瓯模拧日期:侈峄娴形日期:—如口年縄。日广西大学学位论文原创性和使用授权声明作者联系电话:佑如的研究成果。除已特别加以标注和致谢的地方外,论文不包含任何其他个本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品,知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权,即:学校有权保存并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版,允许论检索和传播,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。叮不保密。本人声明所呈交的论文,是本人在导师的指导下独立进行研究所取得人或集体已经发表或撰写的研究成果,也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。文被查阅和借阅,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行本学位论文属于:口保密,在年解密后适用授权。朐谝陨舷嘤Ψ娇蚰诖颉啊獭
其比活力、:蚔。./和岬,蜡样芽孢杆菌三个普鲁兰酶基因的克隆表达、酶学性质研究及分子改造摘要探索获得新型优良的普鲁兰酶基因,丰富普鲁兰酶研究理论,对实现普鲁兰酶的国产化具有深远意义。以开发工业用普鲁兰酶的为目的,采集不同土壤样品混合堆肥,利用平板分离法从中筛选、分离得到一株产普鲁兰酶菌株。经过形态学特征和生理生化特征观察,并结合其低发育分析鉴定其为蜡样芽孢杆菌属,命名为分析菘庵欣堪司俣↖型、型普鲁兰酶基因序列,.锌寺〉玫饺銎章忱济富鵑、和,.得到高效诱导表达。通过镍鲁兰酶,以普鲁兰糖为底物时,最适反应温度及分别为℃和,一Mü从并分别导入大肠杆菌柱亲和层析获得纯化重组酶、和,,缈赼,擒占"蛐推以可溶性淀粉为底物时,最适反应温度及分别为℃和,其比活力、:蛌。“分别为./。重组酶和二者均只能水解Ⅱ..糖苷键,为推章忱济福云章忱/、./、.痬.
糖为底物时,·蚎咂章忱济富钚曰咕哂械突盍Φ淀粉酶活,表明私峁褂騊化为型普鲁兰酶。:筛选分离蜡样芽胞杆菌一章忱济缚寺”泶锩秆活力、:蚔。。分别为痳、痬而重组酶的晟适反应温度及分别为℃、浔然盍Α。和“分别为/和利用反向灾刈槊窹蚉谐醪椒肿痈脑欤玫鋈笔ё樱渲腥笔窺蚎槐泶铮欢笔窺和小量表达,其纯化酶学性质研究结果表明:娜笔Щ虿煌暾芙獻型普鲁兰酶转量均严重下降,由/的表达量降至不足/,表明私峁域一蚎钠章忱济傅谋然睢。和v淳灾档停砻鱊端结构域娜笔Щ虿煌暾芟灾档兔傅钠章忱济富钚浴性分子改造/。
.,琣瓵琤瓵&..,一瑆·,、../,瑀
琎,.琎,:,.琣..,,.!,一產簊,/,,’粀,,’。;一籶;;籱
目录第一章前言⋯普鲁兰酶⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯章忱济傅亩ㄒ逵敕掷唷章忱济妇值睦丛章忱济秆芯考际醴⒄埂⋯⋯⋯⋯⋯概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯传统微生物改造技术⋯⋯⋯基因工程改造技术⋯蛎傅目寺”泶铩章忱济傅姆肿咏峁褂氪呋啤普鲁兰酶的分子结构⋯⋯..⋯⋯⋯章忱济傅拇呋啤⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯普鲁兰酶的应用口⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯芯康哪康暮鸵庖濉际趼废摺第二章材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验材料⋯⋯⋯⋯凡杉旰椭柿!饕C负褪约培养基及主要仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯笛榉椒ā章忱济妇甑纳秆蜃镈的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯的酶切与胶回收⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯硬锏淖;克隆重组子的筛选⋯⋯⋯普鲁兰酶基因的克隆与测序藕烹暮褪杷缒でげ狻章忱济富虻谋泶重组普鲁兰酶的纯化⋯⋯凝胶电泳⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯鞍着ǘ炔舛刈槠章忱济该秆灾恃芯富盍Σ舛⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯攀觥⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯.⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯的连接⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一
普鲁兰酶删“基因的的克隆表达、纯化及酶学特性⋯⋯⋯喁中重组表达质粒的构建、筛选⋯⋯咸烟潜曜记叩幕嬷啤重组普鲁兰酶的分子改造⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯对普鲁兰酶水解产物的分析⋯⋯第三章结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯产普鲁兰酶菌株的筛选