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上传人:3047846861 2016/4/15 文件大小:0 KB

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文档介绍

文档介绍:文献汇报 HPLC 分离南部紫杉树的紫杉醇背景介绍?紫杉醇是红豆杉属植物中的一种复杂的次生代谢产物, 也是目前所了解的惟一一种可以促进微管聚合和稳定已聚合微管的药物。同位素示踪表明, 紫杉醇只结合到聚合的微管上, 不与未聚合的微管蛋白二聚体反应。细胞接触紫杉醇后会在细胞内积累大量的微管,这些微管的积累干扰了细胞的各种功能,特别是使细胞分裂停止于有丝分裂期,阻断了细胞的正常分裂。通过Ⅱ-Ⅲ临床研究,紫杉醇主要适用于卵巢癌和乳腺癌,对肺癌、大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌、淋巴瘤、脑瘤也都有一定疗效。? 1963 年美国化学家瓦尼( . Wani )和沃尔( Monre E. Wall )首次从一种生长在美洋杉( Pacific Yew )树皮和木材中分离到了紫杉醇的粗提物。 1963 年美国化学家瓦尼( . Wani )和沃尔( Monre E. Wall )首次从一种生长在美洋杉( Pacific Yew )树皮和木材中分离到了紫杉醇的粗提物。在筛选实验红豆杉中, Wani 和 Wall 发现紫杉醇粗提物对离体培养的鼠肿瘤细胞有很高活性,并开始分离这种活性成份。由于该活性成份在植物中含量极低,直到 1971 年,他们才同杜克( Duke )大学的化学教授姆克法尔( Andre )合作,通过 x-射线分析确定了该活性成份的化学结构——一种四环二萜化合物,并把它命名为紫杉醇( taxol )。?本文献介绍采用 HPLC 分离生长在中国南部广西省的紫杉树中的紫杉醇实验步骤?一仪器? 1 BT-8100 高效液相色谱? 2 R-201 旋转蒸发仪? 3 78-1 磁转子搅拌器? 4 ZD-Z 搅拌器?材料? 1 广西和湖南的紫杉树标样? 2 蒸馏过且用 μm过滤的溶剂?二色谱条件? C18 (内径 , 长 200mm ,填料直径 5μm)色谱柱;甲醇:水=55:45 作流动相,注射体积 8μL;流速 /min ;灵敏度 , 波长: 227nm ? 标准溶剂? 的紫杉醇标准品溶于 10ml 甲醇中?样品预处理?新鲜树皮,叶子,根洗净→阴凉处晾干→ 40ml 甲醇萃取三次→超声 30分钟→磁搅拌 16小时→残渣溶于 25ml 甲醇→脱脂(石油醚:氯仿=1:1)→脱色(石油醚:氯仿=2:1 )→旋蒸除氯仿→重溶 10ml 甲醇→ 隔膜过滤→8μl分离溶液( HPLC ) ?样品检测?样品都按上述方法处理? , , , , ,和 的标准溶液溶于 10ml 甲醇中。?标准样品和检测样品都经 HPLC 分析检测