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文章编号:———
胶质瘤来源的鉴定及其蛋白质组成研究
金铮,于金录,杨儡,李超,黄海燕
吉林大学第一医院神经外科,吉林长春
摘要:目的初步分析胶质瘤细胞分泌的蛋白组成,探讨胶质瘤来源的潜在免疫调节功能,从而
为进一步利用对胶质瘤进行免疫治疗提供理论依据。方法采用差速离心法从胶质瘤细胞培养上清
液和Ⅲ级星形胶质瘤囊液中分别提纯,用透射电镜鉴定;利用二维电泳分离、分析内蛋白质,并用质谱
技术鉴定了部分蛋白质。结果胶质瘤细胞可以产生,其平均直径约。二维电泳图显示细胞分
泌的含有个蛋白点,与数据库相符的有个;而来自级星形胶质瘤囊液的含有个蛋白点,
与数据库相符的有个;两者有个蛋白点在等电点和表观分子量方面相同,其中包含、结合蛋白、核酸
外切酶、及类分子等。部分蛋白质点质谱鉴定结果为、低密度脂蛋白、细胞受体等。结论胶质瘤
细胞可分泌,其一般特性与已报道的一致,其蛋白组成与其他细胞来源的具有共性,体内和体
外培养的胶质瘤细胞分泌的的蛋白质组成具有同源性与差异性。胶质瘤细胞源的具有一定的免疫
调节功能,可以为胶质瘤免疫治疗提供理论基础。
关键词:;胶质瘤;蛋白质组学;双向凝胶电泳;质谱
中图分类号:. 文献标识码:
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起源于细胞内晚期核内体—原,而且肿瘤细胞容易培养,因此它是一种理想的可
,,即多泡体,。能用于临床的。在免疫系统中,能
似的小囊泡在多泡体内积聚,当多泡体的外够将外来抗原传递给细胞,在免疫调节中发挥作
膜与细胞质膜融合后,其内的小囊泡批量地释放到用。它也可作为一种免疫治疗的新手段,应用在肿
细胞外基质中,从而形成。的功能瘤治疗和免疫耐受等方面。
根据来源细胞的不同而有所不同,其中肿瘤来源的因此,关于的蛋白质研究成为目前亟待
是目前研究的热点,由于其携带肿瘤抗解决的问题。本实验首次用双向凝胶电泳和质谱分
析的方法对胶质瘤细胞培养上清液和Ⅲ级星型
通讯作者胶质瘤囊液中提纯的的蛋白质进行分离并鉴
卢国实验诊断学年月第卷第朔一一
定,为胶质瘤细胞来源的功能研究提供理论第一相等电聚焦结束后,迅速拿出胶条在
依据,也为应用于临床治疗打下基础。平衡液中平衡两次,摇床上振荡,其中第
材料与方法一种平衡液中加入·~ ,第二种平衡液
. 主要仪器及试剂中加入· 碘乙酰胺。
等点聚焦电泳仪、图像扫描仪、恒温循取出胶条在上进行第二相垂
环器、扫描软件、直—,用浓度为% 的聚丙烯酰胺凝胶分
凝胶图谱分析软件瑞典离。恒流、,直至溴酚蓝前沿
;垂到达玻璃板底部。
直电泳仪购自—公司。凝胶采用考马斯亮蓝染色。
固相梯度干胶条—、、、、. 图像分析
.等购自—公司;硫脲、无应用瑞典公司的图
水醋酸钠、硝酸银等均为国产分析纯或色谱纯;水为像分析软件对结果进行分
超纯水。析。查阅蛋白质数据库,具体操作为:登陆
. 实验材料及来源胶质瘤细胞购自中国..,输入关键词,
科学院上海细胞库;级星形胶质瘤细胞囊液胶质中搜索结果