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慢性应激对大鼠空间学均潜伏期延长,平台穿越次数明显减少;怨笛橹校P妥目的:采用孤养与慢性轻度不可预见性应激相结合建立慢性复合应激大鼠模型,通过行为学检测、组织形态学和分子生物学相结合的方法,研究慢性应激对大鼠空间学忆行为和海马、额叶脑区神经细胞粘附分子珿一泶锏挠跋欤约癗一表达变化与应激性行为效应之间的相:互关系,以探讨慢性应激对大鼠空间学忆影蚩赡的中枢机制。方法:锬P停毫炻郧岫炔豢稍ぜ杂そ岷瞎卵椒ń⒙愿春应激大鼠模型。将只雄性大鼠随机分为正常对照组和应激模型组T炷F诩涠照组大鼠正常饲养,模型组给予天的应激刺激。镄形V副辏汗鄄馐笛楣讨辛组大鼠的体重变化,以—ê退空崽撬氖笛槔雌蓝ù笫笥ず蟮男形1浠作为模型是否建立成功的依据。学忆行为指标采用水迷宫和怨脑区组织形态观察:在确认模型建立成功的基础上处死解剖大鼠,全脑固定,切取双侧海马、额叶脑区,常规染色,光镜下观察两组大鼠海马各亚区及额叶脑区神经细胞形态变化,计神经细胞数,并分析各脑区神经细胞数与水迷宫、怨飨钛凹且湫为指标间的相关性。鞍妆泶锛觳猓河妹庖咦橹Х椒ㄑ芯苛阶榇笫蠛B砀餮乔额叶脑区中、鞍妆泶锏谋浠擞肐图像分析系统测定免疫反应产物的平均光密度,并分析各脑区、鞍妆泶锼接隡怨迷宫各项学忆行为指标问的相关性。结果:⒙杂ざ源笫罂占溲凹且涞刃形5挠跋欤耗P妥榇笫蟮奶逯卦龀ち俊⑻撬闳量占总饮水量的百分比均明显减少;旷场实验中的水平穿越格子数、站立次数均明显减少,中央格停留时间、粪便粒数均增加,与对照组相比,差异具有显著性,表明本研究慢性复合应激大鼠模型建立成功;水迷宫实验中,⒙杂ざ源笫蠛B砀餮乔⒍钜赌郧橹翁蜕窬赴挠跋欤光镜下橹翁鄄欤耗P妥榇笫蠛B鞢区锥体阳性细胞层较薄,排列稀浙江理工大学硕士学位论文,生长相关蛋
的表达量呈显著正相关孵。。均呈显著负相关,海马鳱泶锪坑隮迷宫第二天主动回避反应次数之疏紊乱,细胞胞体缩小,细胞间隙大;而对照组大鼠的海马短逑赴逦暾布紧密规则,有明显大量的神经纤维。模型组大鼠海马短逑赴帕邢∈枭⒙遥胞间隙增宽,细胞丢失、数量减少,细胞质染色淡;而对照组大鼠的海马短逑赴排列整齐,细胞质染色深。模型组大鼠海马区颗粒细胞水肿,呈空泡样变性、缺失,细胞层较薄,细胞间隙大,排列稀疏;而对照组大鼠的海马区颗粒细胞清晰完整,分布面积大且密集。模型组大鼠额叶颗粒细胞核浓染,固缩,伴有胶质细胞增牛聚集成堆,位于坏死的神经细胞附近;而对照组大鼠的额叶颗粒细胞形态及分布未见异常。,与对照组大鼠村龋钜炀哂邢灾裕欢钜赌郧帕O赴榧湮尴著性差异。⒙:模型组大鼠海马鳱鞍妆泶锼降停室跣苑从Γ钜赌郧免疫组化结果呈弱阳性反应,对照组均为阳性反应;测量免疫反应产物平均光密度进行半定量分析,模型组与对照组相比差异均显著⑦.模型组大鼠海马区庖咦榛峁腥跹粜苑从Γ哉兆槌是垦粜苑从Γ徊量免疫反应产物平均光密度进行半定量分析,模型组与对照组相比差异具有显著性⒘、怨飨钛忆行为指标之间、和鞍妆泶锪恐涞南喙匦苑治觯海马区、区细胞数与怨诙熘鞫乇芊从Υ问渚氏灾正相关籶.;,海马区细胞数与怨谝惶煅按问涑氏灾负相关;海马岸钜赌郧鳱泶锪坑胨怨天训练平均潜伏期之问间呈显著正相关;海马区泶锪坑胨怨教ù┰酱问涑氏灾相关。海马区谋泶锪俊⒑B鞤岸钜赌郧鳱谋泶锪坑牒B鞢区浙江理工人学硕十学位论文
结论:⒙杂に鹕舜笫罂瘴恃凹且淠芰Γ坏ǚ涟肮空间记忆的获得巩固而且影响空间记忆的提取重现。⒙杂じ谋浯笫蠛B砑岸钜渡窬赴翁峁购褪浚液B砀髑窬赴大鼠空问学忆行为指标之问具有相关性,提示慢性应激损