文档介绍：1
(Musa胚性细胞悬浮系的建立及其原生质体培养与融合的研究中山大学博士学位论文申请人:戴雪梅导师:黄学林教授专业:植物学答辩委员会┟主席:中山大中国·广州20096委员:
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Banana(MusaEstablishmentEmbryogenic甅Zhongshan(SunYatsen)UniversityMajorBotany琙猄StudiesandCultureDaiSubmittedSupervisorProfessorAfortheXue-LinHuang10275China
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..乞只《日学位论文作者签名:栽匈糟学位论文作者签名:蛮匀稽日期:。暾荚耮学位论文使用授权声明原创性声明日期:年否月本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。吕本人完全了解中山大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电文进入学校图书馆、院系资料室被查阅,有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索,可以采用复印、缩文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本子版和纸质版,有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论日期日
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(Musa胚性细胞悬浮系的建立及其原生质体培养与融合的研究摘要专业:植物学博士生:戴雪梅导师:黄学林教授香蕉是继水稻、小麦和玉米之后的世界第四大粮食作物,我国是香蕉的重要生产国之一。但目前香蕉产业普遍遭受多种病虫害的严重威胁,其中由尖孢镰刀菌引起的香蕉枯萎病派硇≈能Cavendish全球香蕉毁灭性的病害。培育抗枯萎病且具有高经济效益的香蕉新种是目前香蕉产业持续发展的重要出路。然而大多数栽培蕉均为不育的三倍体,难于利用传统杂交育种方式对其进行种质改良。而采用生物技术如体细胞杂交等有望可解决香蕉产业面临的问题。建立高效完善的香蕉胚性细胞悬浮系suspensionsECS)目前的文献报道中,未成熟雄花序或雌花序的培养是最常用且重复性较好的ECS型依赖性,对于我国主栽品种中高抗枯萎病派硇≈〉。本论文即采用未成熟雄花序培养法先后建立了大蕉和巴西蕉婧笠訣为材料进行巴西蕉PEG体进行不对称融合及培养的研究,主要结果如下:ECS阺甤Cavendish中山大学博士学位论文ABBparadisiacaAAA
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导出的黄色小颗粒状胚性愈伤组织在液体培养基中启动悬浮培养,经个月持续的筛选继代逐渐形成稳定均质的大蕉8战ǔ傻拇蠼禘在体胚诱导培养基中约d154900的悬浮细胞团在植板密度为%直径为cm)(2021个体胚/SCV)ECS下降,通过在不含瓺的培养基中预培养dM31ABA26发培养基中两周后即开始萌发,萌发后具微弱根系的小苗转至促根培养基中约一个月即获得健壮的小植株,植株转换率约为%。ECS(112)424D(96)养基中经鲈伦笥业纳秆〖檀纬晌榷ǖ腅。直径为的悬浮细胞团在植板密度为20SCVInl(95cm)到最高4-300mLSCV)M3l/腁162/腁使体胚发生受到一定的抑制。巴西蕉成熟体胚在培养基中两周后开始萌发,萌发后具微弱根系的小苗转移至促根培养基中约一月即得到健壮的小植株。200男∠.%果胶酶墓酶解下,)ECS质体的分裂频率及看护培养一月后可见细胞团的形成率均达到最高,分别为%54ECS273813%;而以大蕉?椿は赴保龉鄄斓缴偈侍约的分裂且无法进一步发育成可见细胞团。同时在我们的实验过程中发现龙芽蕉、贡蕉、巴ECS体胚发生能力的强弱成正相关。巴西蕉原生质体再生细胞团在体胚诱导培养基mgL(Musa胚性细胞悬浮系的建立及其原生质体培养与融合的研究Ⅱ
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(1072觯个原生质体唤玀中的植物生长调节物质,虰的含量同时减半或完全去除,体胚发生频率可分别提高为对照的和倍。但这些体胚在进一步继代培养中逐渐褐化或愈伤化,未能获得巴西蕉原生质体的再生植株。盏即蠼逗桶臀鹘对侍宀欢猿迫诤系难芯浚阂郧慷任I-tWcm2(UltravioletUV),处理的巴西蕉原生质体为受体。结果表明照射IOA25mVl胞分裂:采用%的捎盏夹纬山细叩乃诤下约.。照射供6090120s25IOA产物形成可见细胞团所需的时间分别为、和d45d4214-62106M3c1236步继代培养中亦逐渐褐化或愈伤化,未能获得融合产物的再生植株。(Musa,胚性细胞悬浮系,体细胞胚发生,原生质体培养,原生质体融合4-876474-33968中山大学博士学位论文》s
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