文档介绍:紫外分光光度法的应用
紫外分光光度计在药学领域的应用有以下几个方面:
检定物质
根据吸收光谱图上的一些特征吸收,特别是最大吸收波长和摩尔吸收系数是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。在国内外的药典中,已将众多的药物紫外吸收光谱的最大吸收波长和吸收系数载入其中,为药物分析提供了很好的手段。
2 判断是否为同种物质
与标准物及标准图谱对照:将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中,在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质,则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样,也可以和现成的标 准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确,精密度高,且测定条件要相同。
2)比较最大吸收波长吸收系数的一致性:由于紫外吸收光谱只含有2~3个较宽的吸收带,而紫外光谱主要是分子内的发色团在紫外区 产生的吸收,与分子和其它部分关系不大。具有相同发色团的不同分子结构,在较大分子中 不影响发色团的紫外吸收光谱,不同的分子结构有可能有相同的紫外吸收光谱,但它们的吸收系数是有差别的。如果分析样品和标准样品的吸收波长相同,吸收系数也相同,则可认为 分析样品与标准样品为同一物质。
纯度的检验
紫外吸收光谱能测定化合物中含有微量的具有紫外吸收的杂质。如果化合物的紫外可见光区没有明显的吸收峰,而它的杂质在紫外区内有较强的吸收峰,就可以检测出化合物中的杂质。如果化合物在紫外可见有吸收,可用吸收系数检验其纯度。
用差示法来检测样品的纯度。取相同浓度的纯品在同一溶剂中测定作空白对照 ,样品与纯品之间的差示光谱就是样品中含有杂质的光谱。
推测化合物的分子结构
推测化合物的共轭体系和部分骨架
如果一个化合物在紫外区是透明的,没有吸收峰则说明不存在共轭体系 (指不存在多个相间双键)。它可能是脂肪族碳氢化合物、***、***、醇等不含双键或环状结构 的化合物。如果在220-250nm有强吸收,则可能有两个双键共轭系统(如共轭二烯或α,β-不饱和羰基化合物)。如果在250-300nm有强吸收,则可能具有3-5个不饱和共轭系统。如果在260-300nm有中强吸收(吸收系数 =200-1000)或显示不同程度的精细结构,则可能有苯环。如果在250-300nm有弱吸收,则可能存在羰基基团。
区分化合物的构型与构象
互变异构体的鉴别
在有机化学中,会有异构体的互变现象,通过紫外光谱也可鉴别。
如:乙酰乙酸乙酯有***式和烯醇式两种变异构体:
CH3COCH2COO C2H5
(***式)
CH3COH••CHCCH2 HO
(烯醇式)
烯醇式结构中羰基和主链的双键共轭,其雖an为245nm(逦 18000),而***式结构中没有共 轭体系,故在210nm以上没有强吸收带。在极性溶剂(例如水)中,***式结构与溶剂分子因形 成氢键而被稳定,故在极性溶剂中以***式结构为主(约占85%),而在非极性溶剂(例如正乙烷 )中,烯醇式因生成分子内氢而被稳定,故在非极性溶剂中以烯醇式结构为主,在正乙烷溶 剂中烯醇式结构约占96%。这种互变异构的转换情况在紫外光谱就很容易看出来。
实验证明,不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同,这可以利用紫外光谱来判断化合物在不 同溶剂中氢键强度,以确定选择哪一种溶剂
金属离子