文档介绍：苏州大学
硕士学位论文
家蚕幼虫期和蛹期发育相关蛋白质组的研究
姓名:刘艳艳
申请学位级别:硕士
专业:特种经济动物饲养
指导教师:谈建中
20090501
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中文摘要家蚕是重要的鳞翅目模式昆虫,开展家蚕发育相关蛋白质组的研究,对于揭示昆虫性别发育调控机制及其应用有着重要价值。.本文戮家蚕血液和脂肪体为材料,利用甃甅,、雄蚕蛋白质进行研究,以期找到与家蚕发育相关的特异蛋自质,解襄家蚕性别发育的调控机理。。.际酢=峁允荆..技术在家蚕蛋白质组高通量解析、嚣自质混合样品的分离、特异蛋自质组分检测与鉴定及差异蛋自质组研究孛都显组数据库,结果鉴定了鑫奕哂嗟按阎首榉郑直鹗粲静蛋自质或亚基,有种蛋白质或亚基在家蚕及昆虫的基因与蛋白质数据库中尚未被报道,其中与细胞直鸫蛹也龄幼虫期和蛹期不同发育阶段提取雌、雄蚕血液总蛋白质,。结果表明,在家蚕血液蛋自质含量与种类方面检测到了与性别及发育相关的差异性表达;质谱分析及数据库检索结果共获得了其中芳基贮存蛋自、劈黄蛋白原、抗胰凝乳蛋自酶因子为雌特异性表达组分;白家族是家蚕血液中离丰度表达的蛋白组分。7直穑灰约也龄幼虫期和蛹期不同发育阶段雌、雄蚕的脂肪体为材料,优化了适用于脂肪体蛋白质组研究的甀/甈际酰⒔岷螴软件对计捉辛吮冉戏治觥=峁诖啤⑿鄄现咎逯屑觳獾搅吮达差异在兑陨系牡鞍字首榉觯渲龄幼虫期个,吐丝结束化蛹前期个,蛹期个。同时还检测到雌、雄特异性表达蛋自组分个,其中,溆壮期觯滤拷崾记捌个,蛹期觥≡癖泶锪肯嗖倍以上的个和特异表达的瞿喊叩憬薪耗诿盖幸质谱分析,结果鉴定获得了个蛋白质。其中,与性别发育相关的有觯个在究取得了以下结果:示独特的应用价值。同时,采用甃甅际豕菇嘶谥势追治龅囊喜系鞍字骨架和蛋自质代谢相关的组分最多,达甜种。个相匹配的候选蛋自质,剔除冗余部分厝鉴定了其中的个蛋自质组分,分别属于种蛋白质或亚基;雌、雄蚕之间的差异组分主要出现在分子质量。之间,家蚕幼文期帮囊期发育耀关爨皇覆缓豹磺究孛文摘要
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琑。应用生物信息学方法对家蚕蛋白的基因进行了电子克隆,为,等电点为揖劾喾治霰砻鱎鞍椎陌被嵝蛄性诹鄢崮坷コ嬷种重要的差异表达蛋白质一活化蛋白激酶芴雄性中上调表达,分别为肌动蛋白和调宁蛋白;鲈诖菩灾刑匾毂泶铮直鹞O赴质力蛋白轻链、的亚基和激活蛋白激酶芴澹个在雄性中特异表达,分别为次黄嘌呤核苷酸环水解酶和原肌球蛋白。与变态发育相关的有觯个在蛹期上调表达,均为家蚕鞍祝个在蛹期特异表达,为胰凝乳蛋白酶抑制剂。非常保守。应用分子生物学实验技术,从家蚕基因组校琍克隆了晗阜治隽怂ǖ牡鞍字屎螅⑾衷诓煌⒂逼诘拇啤⑿鄄现浯嬖谝获得了长为的重组序列,基因编码区为嗦个氨基酸,分子量基因,序列总长为,含有瞿诤雍个外显子,通过家蚕全基因组比对,结果与跣蛄幸恢滦晕ィ倚薷戳似渲个主题词:家蚕;性别发育;差异蛋白质组;双向电泳;质谱分析作者:刘艳艳指导教师:谈建中家蚕幼虫期和蛹期发育相关蛋白质组的研究中文摘要
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期:掣研究生签名:芝刁圣垒叠鱼日研究生签名:匆型型鱼日期:苏州大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明学位论文使用授权声明方式标明。本人承担本声明的法律责任。经发表或撰写过的研究成果,也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确公布ǹ论文的全部或部分内容。论文的公布ǹ授权苏州大本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含其他个人或集体已苏州大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、清华大学论文合作部、中国社科院文献信息情报中心有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外,允许论文被查阅和借阅,可以学学位办办理。导师签名:日期:
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言引家蚕是重要的经济昆虫,更是经典遗传学研究的模式生物之一,对研究昆虫性别发育调控机制具有重要应用价值。多项研究证明雄蚕比雌蚕抗性好,体质强,叶丝转化率高,单养雄蚕比普通养蚕可省桑叶成本约%,提高%的产丝量,而且雄蚕丝纤度细、偏差小,丝质好,利于缫制高档生丝。因此,研究家蚕的性别发育调控机