文档介绍：荧光免疫层析技术的原理与进展
介绍人:罗敏
炎光免疫层析技术的基本原理
层析法( chroma tography)的原理是利用混
合物中各组分的物理性质之差(如吸附力、
分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、
分配系数等)而建立来的一种分离技术。
层析系统是由固定相( stationary phase)
和流动 Mobile phase)相组成。
固定相回物项以固定于固体物质上的
成分
流动相是可以流动的物质,如水或各种溶
剂
层析过程:当待分离混合物随流动相通过
固定相时,由于混合物各组分的理化性质
的差异,与固定相相互作用弱的组分随流
动相移动时受到的阻滞作用小,向前移的
速度快;与固定相相互作用强的组分向前
移动的速度慢。从而实现混合物中各组分
的分离
免疫层析法
免疫层析技术是建立在层析技术和抗
原一抗体特异性免疫反应基础上的
项新兴免疫检测技术
免疫层析技國定有检测线和控制线的条状纤
推层析啊为固定相,测试液为流动相,通过毛
细作用使待测物在层析条上移动。
待测物在T线处发生特异性免疫反应。
游离物在C线处发生免疫反应
待测物
层析方向
免疫反应
免疫层析技术基本原理示意图
荧光( fluorescence
荧光物质吸收激发光的能量后,电子从基态跃
迁到激发态,当其回复至基态时,以发射光形式
释放出能量,称为荧光
发射光谱和激发光谱
>发射光谱是指固定激发波长,在不同波长下
记录的样品发射荧光的强度。
>激发光谱是指固定检测发射波长,用不同波
长的激发光激发样品记录的相应的荧光发射
强度。
荧光效率
定义:荧光物质分子将光能转变成荧光的百分率
计算公式
发射荧光的光量子数(光强度)
荧光效率=吸收光的光量子数(激发光强度)
荧光寿命
定义:荧光物质被激发后所产生的荧光衰减到一定程
度时所用的时间
>各种荧光物质的荧光寿命不同
荧光淬灭
定义:荧光物质在某些理化因素作用下,发
射荧光减弱甚至消退称为荧光淬灭
引起荧光淬灭的因素:有如紫外线照射、
高温、某些硝基化合物、重氪化合物等
免疫层析技國定有检测线和控制线的条状纤
推层析啊为固定相,测试液为流动相,通过毛
细作用使待测物在层析条上移动。
待测物在T线处发生特异性免疫反应。
游离物在C线处发生免疫反应
层析方向
免疫反应
免疫层析技术基本原理示意图
用荧光免疫层析法
夹心法
竞争法
双抗原夹
以抗体夹心法