文档介绍：江南大学
硕士学位论文
钝齿棒杆菌N-乙酰谷氨酸激酶编码基因argB的克隆表达研究
姓名:刘飞
申请学位级别:硕士
专业:微生物学
指导教师:饶志明;许正宏
20080801
摘要特殊治疗用途的重要原料。近年来,随着我的逐步提高,人们对健康方面给于越来越多的关注,痪ò彼岬男枨罅恳苍谥鹉晟仙为研究菌株,依据现已知的的关键酶阴9劝彼峒っ男灾屎妥饔眉癗贑是革兰氏阳性工业用菌株,其合成精氨酸的关键酶是由基因编码,由于钝齿棒杆菌的遗传表达体系的研究报道甚少,本论文构建了產畉.、產霰泶镏柿2⒊晒υ诖蟪Ω司斜泶且进行了酶的活性研究。结果发现,,產泶锪孔钚 M崩胊谋泶镌靥錺上含有·榘彼岜昵┑奶氐悖捎肗狽柱亲和层析法对目标蛋白进行了纯化,纯化获得的重组的比酶活达中,由于无法通过该方法转入表达量较小,×个钝齿棒杆菌转化子瓹畉并通过摇瓶发酵挑选出精氨酸产量最高的转化子瓹云疞与出发菌株甤的利用率并促使谷氨酸的代谢流大量流向精氨酸生成的途径,提高精氨酸的产量。关键词:ò彼幔鄢莅舾司阴9劝彼峒っ福泶铮炕秆灾剩⒔ò彼崾侨颂搴投锾迥诘陌氡匦璋被幔彩巧锾迥蛩匮返囊恢种匾V屑代谢物,在医药工业上具有广泛的用途,另一方面,ò彼嵋彩鞘称酚Q⒒逼坊论文以钝齿棒杆菌ò彼岽煌揪独靡糯üこ淌侄窝芯糠治鯟合成精氨酸中的加强表达对其对产精氨酸的影响。钝齿棒杆菌痬炕妒.。同时对纯化得到的重组酶学性质进行了初步研究,结果表明:的最适温度为℃,。。蠳拿富钗/,%;./啾忍岣吡嗽%,但却发现的过量表达影响到了菌体的正常生长,生长相对缓慢。通过氨基酸自动分析仪对发酵液中氨基酸的定量分析,证明了的过量表达明显的促进了前体物质谷氨酸
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迎皇:豇:独创性声明本人声明所呈交的学位论文是苯人在导师指导下进行的研究工作及取授权的说明江南大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存,汇编学位论文,,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含本人为获得江南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文作者完全了解江南大学有关保留、使用学位论文的规定:许论文被查阅和借阅,:导师签名:名:日.~‘
鞍彼嵘镅б庖寮捌溆τ鞍彼岬纳镅б庖鞍彼岬囊搅谱饔第一章绪论ò彼瓵蛐碙·,化学名为话被一胍基戊酸,其分子式为ò彼崾且恢趾须一募钚园被幔铀形龀龅奈0咨ɡ庑谓峋В分子毖丈ū湮W厣ǎ时即可分解。比旋光度【。【】为,不同基团在时的白和核蛋白。它是天门冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸、轻脯氨酸和聚胺贰⒕ò芳熬等转化为高能磷酸化合物一磷酸肌酸的中间体,在肝脏内与尿素的形成有关;在生理活性年,诺贝尔医学奖授予了研究一氧化氮在细胞、组织间信使作用的三位美国科学家。精氨酸是体内合成的前体物质,由此引发了世界性的精氨酸研究热潮。研究表明,通过通路所产生的是许多生理功能如血管松驰、抗血小板聚集、神经元活动等的重要递质,并参与杀灭微生物,杀伤瘤细胞,介导~ò彼岱肿咏峁故结晶水;从乙醇中析出的为无水单斜片状结晶;易溶于水,微溶于乙醇,不溶于乙醚;具强碱性,水溶液能从空气中吸收二氧化碳。在蹦苁ニ分子结晶水,解离常数籶簆鹊绲阄瓵是人体代谢的一种重要氨基酸,所有的机体组织都利用铣上赴方面,与生长激素、胰岛素和胰高血糖素等激素诱导分泌有关】。程,对机体起着全方位的保护作用,对多种疾病均有较好的疗效ò彼岵斡氚被岽.
鞍彼岬钠渌饔眉坝猛发生肝细胞坏死时,蛋白质的分解产物一氨不能转变成尿素而排出,引起血氨升高。小酮戊二酸与氨作用生成谷氨酸。由于N於嵯墓啵鹑人嵫芳跞酰谷磷酸腺苷二钠杉跎伲竽阅芰抗┯Σ蛔愣⑸习鸶位杳浴>ò彼可加速血氨转化为尿素排出,维持体内氮平衡,逆转大脑障碍,从而治疗肝昏迷制。分。因此,可以治疗由于缺精、少精所致的男性不育症【6杂ざ此担ò彼崾且种必需氨基酸,可促进高级认知功能的发育。ò彼岫孕难9芟低车淖饔成的使肌细