文档介绍：复旦大学
硕士学位论文
纳豆激酶基因克隆及其在大肠杆菌和乳酸乳球菌的表达研究
姓名:辛及娣
申请学位级别:硕士
专业:微生物学
指导教师:范长胜
2008-10-30
所分离到的纳豆激酶基因,分别导入大肠杆菌、乳酸乳球菌摘要方面改良菌种、优化发酵条件和生产工艺,另一方面运用基因工程手段将纳豆激研究成果:本项工作分离得到的纳豆激酶基因胛南妆ǖ:纳豆是日本传统发酵食品,日本学者从纳豆中分离得到纳豆激酶,羌钚运堪彼岬鞍酌福煽莶菅挎吒司薪锨康溶血栓能力,并且具有安全性高、半衰期长、易吸收、成本低等优点,因而在近十几年引起了广泛关注。近年来,国内外学者对纳豆激酶的生物化学性质进行了一系列的研究,目前纳豆激酶的性质已研究得非常清楚。在纳豆激酶的应用研究方面,科研工作者一酶应用到更加广泛的领域。本研究从市售纳豆中分离得到纳豆芽孢杆菌,提取其基因组,利用聚合酶链式反应┰龅玫胶啥辜っ傅腄片段痪庑鉴定后,利用砑﨎分析基因和氨基酸序列。利用增强型绿色荧光蛋白作为报告标记研究了乳酸乳球菌泶镌靥在不同大肠杆菌及乳酸乳球菌内的表达效果;并运用克隆我们表达。腘蛴黾罨钜欤葱晕%,,在械谋泶锪渴侨樗崛榍蚓内表达量的倍。本研究中,成功利用了表达载体在内表达颍獾妹富钗疞,并将此表达载体电击转化至乳酸乳球菌中,得到表达菌株。本研究工作为纳豆激酶在乳酸菌内的表达工作奠定了基础。同时研究了在大肠杆菌及乳酸乳球菌内的的复制性、表达效果等,为以为表达载体的其他工作人员的研究提供了理论基础和技术支持。关键词:纳豆激酶;纳豆芽孢杆菌;大肠杆菌;乳酸乳球菌;复旦人学硕士学位论文
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樱琓,”⑾化吸收。研究表明,纳豆的保健功能主要与其中的纳豆激酶⒁.纳豆激酶溶解血栓的作用【,并通过实验推断纳豆激酶是一种丝氨酸蛋白酶。在此之后,.啥辜っ傅幕蚪峁埂⒌⒔褪称罚延卸Ф嗄甑睦史,是日本最具民族特色的食品之一【俊D啥挂云涠捞氐姆缥叮谱鞣奖愫陀行的营养和保健功效,深受日本国民的喜爱。据日本行业协会年的统计【,。纳豆是由枯草芽孢杆菌发酵而成,具有非常丰富的营养价值,富含蛋白质、各种氨基酸、维生素、矿物质,经发酵后营养更容易消黄酮、皂青素、维生素等多种功能因子有关纳豆激酶悄啥乖诜⒔凸讨杏赡啥咕囊恢炙堪彼蛋白酶。年,日本学者甋仁紫确⑾帜啥辜捌溲挝鎏崛∥镌谔逋饩哂众多学者相继对纳豆激酶的基因结构、蛋白结构、理化特性、酶作用影响因素及酶促反应机理展开一系列的研究。由于纳豆激酶独特的安全性能及优异的溶栓能力,从而逐渐赢得了广泛的关注。.纳豆激酶的结构年,日本学者状伪ǖ懒耸褂媚袂狗ǹ寺〉桨ǖ骺匦蛄在内的的纳豆激酶全长基因序列。该基因以F鹗济苈胱樱婧笫槌傻脑亩量蚣芙峁梗虻’末端为三个连续的终止密码子依赖性终止序列。。复皿人学硕士学位论文
樱琓,”⑾化吸收。研究表明,纳豆的保健功能主要与其中的纳豆激酶⒁.纳豆激酶溶解血栓的作用【,并通过实验推断纳豆激酶是一种丝氨酸蛋白酶。在此之后,.啥辜っ傅幕蚪峁埂⒌⒔褪称罚延卸Ф嗄甑睦史,是日本最具民族特色的食品之一【俊D啥挂云涠捞氐姆缥叮谱鞣奖愫陀行的营养和保健功效,深受日本国民的喜爱。据日本行业协会年的统计【,。纳豆是由枯草芽孢杆菌发酵而成,具有非常丰富的营养价值,富含蛋白质、各种氨基酸、维生素、矿物质,经发酵后营养更容易消黄酮、皂青素、维生素等多种功能因子有关纳豆激酶悄啥乖诜⒔凸讨杏赡啥咕囊恢炙堪彼蛋白酶。年,日本学者甋仁紫确⑾帜啥辜捌溲挝鎏崛∥镌谔逋饩哂众多学者相继对纳豆激酶的基因结构、蛋白结构、理化特性、酶作用影响因素及酶促反应机理展开一系列的研究。由于纳豆激酶独特的安全性能及优异的溶栓能力,从而逐渐赢得了广泛的关注。.纳豆激酶的结构年,日本学者状伪ǖ懒耸褂媚袂狗ǹ寺〉桨ǖ骺匦蛄在内的的纳豆激酶全长基因序列。该基因以F鹗济苈胱樱婧笫槌傻脑亩量蚣芙峁梗虻’末端为三个连续的终止密码子依赖性终止序列。。复皿人学硕士学位论文
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