文档介绍：山东大学试验汇报 11月27日
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科目：微生物学试验题目：微生物大小和数量测定姓名：丁志康
目标要求
学****并掌握用测微尺测定微生物大小方法。
增强微生物细胞大小感性认识。
3. 明确血细胞计数板计数原理。
4. 掌握使用血细胞计数板进行微生物计数方法。
基础原理
一）微生物大小测定
微生物细胞大小是微生物基础形态特征，也是分类判定依据之一。微生物大小测定，需要在显微镜下，借助于特殊测量工具——测微尺，包含目镜测微尺和镜台测微尺。
镜台测微尺是中央部分可有正确等分线载玻片，（即10µm）。镜台测微尺并不直接用来测量细胞大小，而是用于矫正目镜测微尺每格相对长度。
目镜测微尺是一块可放入接目镜内圆形小玻片，其中央有正确等分刻度，有等分为50小格和100小格两种。测量时，需将其放在接目镜中隔板上，用以测量经显微镜放大后细胞物象。因为不一样显微镜或不一样目镜和物镜组合放大倍数不一样，目镜测微尺每小格所代表实际长度也不一样。所以，用目镜测微尺测量微生物大小时，必需先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定大放大倍数目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表相对长度。然后依据微生物细胞相当于目镜测微尺格数，即可计算出细胞实际大小。
球菌用直径来表示其大小；杆菌则用宽和长范围来表示。µm，~×2~3µm。
二）微生物数量测定
微生物数量测定有多个方法，此次试验中使用显微镜直接计数法。显微镜直接计数法是将少许待测样品悬浮液置于一个尤其含有确定面积和容积载玻片上(又称计菌器)，于显微镜下直接计数一个简便、快速、直观方法。现在中国外常见计菌器有：血细胞计数板、Peteroff-Hauser计菌器和Hawksley计菌器等，它们全部可用于酵母、细菌、霉菌孢子等悬液计数，基础原理相同。后两种计菌器因为盖上盖玻片后，，，所以可用油浸物镜对细菌等较小细胞进行观察和计数。（除了用这些计菌器外，还有在显微镜下直接观察涂片面积和视野面积之比估算法，此法通常见于牛乳细菌学检验。)显微镜直接计数法优点是直观、快速、操作简单。但此法缺点是所测得结果通常是死菌体和活菌体总和。现在已经有部分方法能够克服这一缺点，如结合活菌染色微室培养（短时间）和加细胞分裂抑制剂等方法来达成只计数活菌体目标。本试验以血球计数板为例进行显微镜直接计数。
用血细胞计数板在显微镜下直接计数是一个常见微生物计数方法。该计数板是一块特制载玻片，其上由四条槽组成三个平台；中间较宽平台又被一短横槽隔成两半，每一边平台上
各列有一个方格网，每个方格网共分为九个大方格，中间大方格即为计数室。计数室刻度通常有两种规格，一个是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格；另一个是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格，但