文档介绍：实验1：
大肠杆菌的培养和分离
大肠杆菌（）
分布：人和哺乳动物肠道，此外还广泛分布于水、污水、土壤、谷类、乳制品等当中。
大肠杆菌在人体的_____中一般对人体无害，但任何
大肠杆菌如果进入__________都会对人体产生危害。
大肠杆菌是_______工程中被广泛采用的工具。
肠道
泌尿系统
基因
革兰氏______（填阴或阳）性菌
阴
代谢类型：
异养，兼性厌氧型
生长适宜温度：
质粒、
EcoRⅠ限制酶、
-DNA连接酶、
受体细胞
37℃左右
易培养、生活周期短等特点。
细菌的代谢类型
自养型细菌
异养型细菌:
光合自养型:
化能自养型:
大部分腐生菌和寄生菌
如蓝细菌
如硝化细菌
1、同化作用类型
2、异化作用类型
需氧型细菌
厌氧型细菌
兼性厌氧型细菌
大多数细菌
如破伤风杆菌
如酵母菌、大肠杆菌。
大肠杆菌属于异养、兼性厌氧型细菌
大肠杆菌
酵母菌
放线菌
霉菌
菌落：单个或少数细菌在固体培养基上大量生长繁殖时，所形成的肉眼可见的具有一定形态结构的子细胞群体。
不同微生物形成的菌落具有不同
的特征，是鉴定菌种的重要依据。
如菌落的大小、形状、边缘、光泽度、颜色、透明度等。
菌落的概念
白色或乳白色，光滑
大肠杆菌菌落：
二、培养基
不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方
3、调节pH
1、培养基的种类
2、成分
水、碳源、氮源、无机盐、生长因子
(生长因子即细菌生长必需，而自身不能合成的
化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)
真菌：5～6 细菌：～
4、有时会加一定量的***化钠以维持一定的渗透压
(固体、半固体、液体)

无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止________污染的方法。
三、无菌操作
_________必须无菌、
_________也必须要无菌、
___________时不能带入其他杂菌
主要包括：
杂菌

消毒：使用较温和理化因素，仅杀死物体表面或内
部的一部分对人体有害的微生物的过程。不能杀死
芽孢和孢子。
灭菌：使用强烈的理化因素消灭物体内外所有微生
物，包括芽孢和孢子。
各种器具
培养基
转移菌种
高压蒸汽灭菌
洒精灯灼烧灭菌
干热灭菌
灭菌方法：
煮沸消毒法
巴氏消毒法
化学药剂消毒法（酒精、***气等）
紫外线消毒法
消毒方法：
3、常用的灭菌和消毒的方法
培养基、无菌水、
各种耐高温的玻璃金属器具
需要保持干燥
耐高温的玻璃金属器皿
接种环等金属器具
高压蒸汽灭菌锅
1kg/cm2 、121℃
下维持15min.
请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。
如果需要，请选择合适的方法。
（1）培养细菌用的培养基与培养皿
（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管
（3）实验操作者的双手
答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
（一）制备LB培养基（通用的细菌培养基）
1、配方：，，
***，水50ml
（配固体培养基再加琼脂1克）
溶解
计算称量
调pH
分装
加塞，包扎
2、流程
四、操作步骤
灭菌
倒平板
①分装：注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，因此在将培养基转移到三角瓶或试管中时必须用__________。
②加塞：试管用塑料盖或________；三角瓶口用_______或_________封口,再用_________或报纸封口。
③包扎：用________或报纸
三角漏斗
棉花塞
封口膜
6层纱布
牛皮纸
牛皮纸
高压蒸气灭菌法
④灭菌
1）加水：
2）装锅：
向外层锅内加入适量的水，加水的要求是_________.
物品放置的要求______________________：
加盖：将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的_______内。
再以________方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺
栓松紧一致，勿使漏气。
不触及内胆
整齐、稳定、留出空隙
排气槽
两两对称