文档介绍：第三军医大学
硕士学位论文
Ⅳ型胶原粘附分选后表皮干细胞基本生物学特性的研究
姓名:崔洪勋
申请学位级别:硕士
专业:皮肤病与性病学
指导教师:伍津津
20090501
型胶原粘附分选后表皮干细胞基本生物学特性的研究要摘本实验通过不同时间内角质形成细胞对Ⅳ型胶原的粘附特性不同,对其进行分时分将分离后人包皮的角质形成细胞接种到预先铺有廷粜徒涸牧装逯校结论:利用Ⅳ型胶原分选后的角质形成细胞具有干细胞的特征,以粘贴钗表皮干细胞Ⅳ型胶原细胞分选粘附力发展,种子细胞的选择成为一个关键因素。皮肤组织工程的研究显示表皮干细胞较其他多能干细胞有更大的优势,因此如何快速分选表皮干细胞也就成为一个热门的课题,选,并对分选后的细胞进行生物学特性的研究,为表皮干细胞的分选提供实验依据。细胞在上述四个时段粘附在Ⅳ型胶原上的粘附力及粘附在ⅱ粜徒涸粘附细对贴壁南赴屑ǎ魇较赴遣釨纤卦谒氖倍蔚难粜员泶锪浚相差显微镜进行细胞形态学观察,并对四时段进行克隆形成率的测定。结果显示:形态上贴壁细胞小而圆,反光能力强,核浆比大。随着时间的延长,贴壁细胞数逐渐增与湮尥臣蒲б庖澹琁型胶原与胶原无差别。整合素间接免疫荧光、免疫组化显示贴壁细胞缶Q粜裕珻庖咦榛允静糠盅粜裕馄さ鞍阴性表达,偶有阳性,流式细胞仪测四时段整合素阳性率表达量均为ァ理想,可用于表皮干细胞的生物学特性的研究。关键词随着组织工程皮肤在皮肤及系统性疾病临床应用丈酥瘟坪突蛄品上的不断、跸渲蟹直鸱跤齦后,吸去未粘附细胞,离心法测粘附胞的粘附力。细胞计数器测粘附数及细胞大小,并用整合素、外皮蛋白、、多,谡掣较赴有统计学意义.、及尥计学意义,在掣降南赴钚。寺⌒纬陕与、,粘附力有统计学意义,第二军医人学硕士学位论文
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论文作者签名:覆幽椰幻日期:型星:坐第三军医大学研究生学位论文独创性声明第三军医大学研究生学位论文版权使用授权书论文作者签名:指导教师签名:期:秉承学校严谨的校风和科研作风,,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。本人完全了解第三军医大学有关保护知识产权的规定,即:,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为第三军医大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容C苣谌莩,可以采用影印、缩印或其他手段保存论文。日
型胶原粘附分选后表皮干细胞基本生物学特性的研究吉类角质形成细胞:第一类为干细胞,位于表皮一真皮结合处,紧紧地与基底板相粘附为基底细胞的%U庑┫赴远猿品至鸦蚍嵌猿品至训姆绞讲哟戳礁龈上胞,或两个短暂扩充细胞,或一个干细胞及一个短暂扩充细胞。第二类为短暂扩充细胞笤颊蓟紫赴。较干细胞有更高的复制频率,但倍增次数非常少,它们进一表皮干细胞最显著的两个特征是它的慢周期性与自我更新能力。慢周期性在体内丛谛律锵赴至鸦钤臼辈羧腚氨昙堑胸苷,由于分裂缓慢,因而可长期探测到放射活性,自我更新能力表现为离体培养时代细胞。此外,表皮干细胞还有一个显著特点就是对基底膜的粘附性,这一特性通过特性的基本条件。胶原是基底膜的主要成份,表皮干细胞对其亦有粘附性,在正常人皮肤,这些细胞粘附分子的表达被限制在表皮的基底层,其中对Ⅳ型胶原的粘附最克隆形成率也不同【,标记滞留细胞在苋ú空掣降舰粜徒涸希紫赴目前,体外分离、纯化表皮干细胞也是利用干细胞对细胞外基质的粘附性进行的。年,等采用差速粘附的方法分选表皮干细胞,〉慕侵市纬上赴目寺⌒纬陕式鑫%,因此被认为是一种有效表皮位于皮肤的最外层,主要由角质形成细胞和非角质形成细胞构成。由里到外可分为四层:基底层、棘层、颗粒层,角质层。在人