文档介绍：福建医科大学
硕士学位论文
中国人喉鳞癌EGFR突变基因的研究
姓名:赖海春
申请学位级别:硕士
专业:耳鼻咽喉科学
指导教师:王德生;黄建民
2010-03
中国人喉鳞癌 EGFR 突变基因的研究
硕士研究生:赖海春
导

师: 王德生副教授
摘

要
目的:研究中国人喉鳞癌 EGFR 基因突变情况
方法: DNA Mini Kit 试剂盒法提取 28 例喉癌及其癌旁组织、10 例声带
息肉患者喉部正常组织 DNA,采用突变富集 PCR 法提取新鲜组织标本中突变 EGFR 基
因,通过 EGFR 基因突变液相芯片检测 EGFR 基因突变的情况,从而比较肿瘤组织与
癌旁组织、肿瘤组织与喉部正常组织 EGFR 基因突变的差异;2. QIAamp DNA Mini Kit
试剂盒法分别提取 28 例喉癌患者手术前、手术后第 1 天、手术后第 5 天和手术后第
10 天等不同时期共 112 份血清中的游离 DNA,以突变富集 PCR 法富集 EGFR 突变基因,
通过 EGFR 基因突变液相芯片的检测,观察肿瘤切除术前、术后 EGFR 基因突变的动态
变化。
结果: 28 例,组织表达 EGFR 突变基因阳性者 4 例,占全部病例数
的 %,4 例突变均位于外显子 20 中,其中 3 例突变类型为 T790M,另外 1 例突
变类型则尚未明确;癌旁组织以及喉部良性病变正常组织中均未检测出 EGFR 基因突
变;但是这种比较在统计学上没有显著性差异(P> ); 份血清样本中,
术前血清只有 1 例检出 EGFR 突变基因,术后血清 EGFR 突变基因阳性者总共 7 例,
其中 6 例突变位于外显子 21,类型为 L858R;1 例突变位于外显子 20,突变类型为
T790M;这其中还有 1 例同时具有外显子 20、21 上突变,外显子 21 上为 L858R,外
显子 20 上突变类型则尚未明确。从时序上看,患者血清中 EGFR 基因突变似乎存在
动态波动性,但绝大部分都出现在手术后第 5 天。但是,这些数据在统计学上仍然
没有显著性差异(P> )。
结论: 4 例存在 EGFR 突变(占全部病例的 %),但与癌旁组
织、喉部正常组织比较无统计学意义(P>),因此认为喉部鳞癌中 EGFR 基因突
变可能仅是偶然现象,尚不能作为检测中、早期喉癌存在与否或者指导肿瘤靶向治
疗的指标,需进一步扩大样本量深入研究。
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EGFR 突变基因的动态变化虽然在统计学中无显著性差别(P>),但我
们认为可能系病例数太少所致,而创伤或者别的原因可能是血清游离 DNA 产生的可
能机制。因此,血清游离 DNA 的来源机制有待进一步阐明。
关键词:喉肿瘤鳞状细胞癌 EGFR 基因基因突变
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The Study on the Somatic Mutations of EGFR in Chinese Squamous
Cell Carcinoma of Larynx
Postgraduate: Haichun,Lai
Tutors: Associate Prof. Desheng,Wang
Abstract
[OBJECTIVE]
To detective the Epidermal growth factor receptor (EGFR) gene mutation in
Chinese larynx squamous cell carcinoma and serum, and to analyze the affect
of EGFR gene mutation detection in clinical works.
[METHODS]
The DNA was collected by QiAamp DNA Mini Kit. The EGFR gene mutations were
examined in fresh tissues of 28 cases of laryngeal squamous cell carcinoma,
adjacent nontumorous laryngeal epithelium and tissues of 10 cases of normal
other diseases. Besides, the EGFR gene mutations of the serum of 28 cases
were detectiveded, and then, the mutations