文档介绍：西南大学
硕士学位论文
球孢白僵菌几丁质酶基因Bbchit1抗病作用研究
姓名:郭绍辉
申请学位级别:硕士
专业:作物遗传育种
指导教师:裴炎
20070601
球孢白僵菌几丁质酶基因抗病作用研究中文摘要作物遗传育种专业硕士研究生郭绍辉指导教师裴炎教授关键词:’擒占拿浮<付研究了圆糠种参锊≡婢咦用确⒑途可さ囊种谱饔谩M蓖ü┡└司⒓觳饬吮铣嘟湍副泶锘竦玫募付≈拭窧对部分植物病原真菌孢子萌发和菌丝生烟草赤星病、烟草青枯病的抗性均有不同程度的提高。质酶能有效降解大多数真菌细胞壁的重要组分之一的几丁质,因此,几丁质酶的抗菌作用备受人们关注,前人的研究也表明超量表达几丁质酶基因能提高植物对病原菌的抗性。本研究以毕赤酵母为表达系统,制备丝状真菌球孢白僵菌付≈拭窧,导将蜃H胧芴逯参镅滩中,研究了转基因烟草的抗病性。主要结果如下:长的抑制作用。结果表明:芤种苹乒匣颐共【⒂筒司瞬【⒂衩仔“卟【撞撕诎卟【、柑橘绿霉菌丝的生长,同时对烟草赤星病菌、白菜黑斑病菌、黑曲霉、棉花黄萎病菌、柑橘绿霉菌孢子的萌发有抑制作用,⒔ḿ付≈拭富駼转入烟草中,橹旧ê蚐咏唤峁砻鳎蛞颜系窖滩莼蜃橹校⑽榷ㄒ糯ā<付≈拭富钚圆舛ń峁砻鳎个代烟草纯合株系的几丁质酶活性均高于野生型对照。分析也表明,蛟谧;蜓滩葜心芪榷ū泶锬勘甑鞍住⒍个代烟草纯合株系进行了抗病性检测,结果表明:鯰滩荽亢现晗、、、、胍吧投哉障啾龋诙韵妇圆『ρ滩萸嘟鄄〉目剐陨希∏指数分别降低了ァァ.%、.%、.%;在对真菌性病害烟草赤星病的抗性上,病斑面积分别减少了.%、.%、.%、.%、.%。转滩荻’
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两南大学硕学位论文築,珹琑,
第一章文献综述抗病基因工程策略植物是人类衣食住行的重要来源,可以说植物与人类生活息息相关,植物病害能导致植物减产以及产品品质下降,严重影响着人类生活,甚至影响到人类生存。据统计,每年全球因植物病害造成的作物减产达%以上钊笾驳龋.,T谀承┠攴荩参锊『ι踔粱岬贾伦魑锞眨年在苏格兰爆发的马铃薯晚疫病导致苏格兰大饥荒,几百万人因此流离失所。此外,病原菌的侵害还导致作物品质下降;病菌所产生的有毒物质缁魄顾亍镰刀菌素等匀颂褰】荡次:ΑH绻芸刂浦参锊『Γ唤瞿苡行У鼗航饬食短缺问题,而且对提高人们的生活质量也有重要意义。早在世纪中叶,人类就开始研究如何防治植物病害,人们开始有意识的选择性状好的作物以及在病害发生后存活作物的种子进行栽种。另外,人们也通过改进栽培措施,以及施用化学农药等方法来防治植物病害,但是改进栽培措施并不能从根本上防治植物病害,施用化学农药更会造成环境污染,且病原菌也易产生抗药性。培育抗病作物品种,则是控制作物病害最有效的然而,植物自身的抗性资源有限,许多抗病基因存在于野生种或近缘野生种中,利用起来难度大。而且病原菌变异频繁,可导致抗病品种迅速失去抗病性,常规育种往往难以控制这些病害的危害,此外常规育种手段育种周期长,要获得多个目标性状均基本纯合稳定的品系,一般要近十年甚至几十年时间,育种进度难以满足生产要求。上个世纪八十年代以来,随着生物技术的兴起,利用现代生物技术分离、克隆和转化抗性基因,对单一性状进行根本改良成为可行。该途径的优点是定向性强、基因型来源丰富、不会受植物不良农艺性状的影响、不受抗源亲缘关系限制、育种周期短、理论上不存在性状负相关连锁,一次克隆可用于多次转化等。因此,采用基因工程改良植物的抗病性是植物病害防治的一条重要途径。到目前为止,随着对植物与病原菌相互作用以及抗病和致病基因本质研究的不断深入,一系列专化抗性和广谱抗性的抗病基因陆续被克隆,转基因改良植物抗病性已取得初步成效。目前,在利用基因工程手段创造抗病植物种质中,抗病基因的选择通常有两种办法。文献综述
飚一例如,等克隆的水稻抗白叶枯病基因妇痪哂泄闫卓共⌒浴W;蛩策略:一是利用植物的颍欢抢镁哂泄闫子氤志每剐缘幕颍该策略的理论依据是“基因对基因”模型,该模型是世纪年代,,阐明了植物抗病遗传和病原体毒性遗传的联系。这个模型认为,只有当植物有显性抗性基因,,病原体表达互补的显性无毒基因保参锊呕岜硐挚剐裕慈缫V参锒圆≡宀抗性幌嗳菪,在宿主和病原体中分别需要互补的显性基因对。植物抗性基因或病原体无毒基因发生改变或丢失,即在植物中湮猺;或者在病原体中变为参锒圆≡宀徊剐相容性飧瞿P涂墒视糜诖蠖嗍钐逍椭物和病原体的相互作用蛞话惚硐治V参锟共∑分侄圆≡硇≈值淖ɑ钥剐裕云淇共性具有很强的专一性,且容易因病原菌群体生理小种的变化而被克服以,5承㏑基因也能赋予寄主植物持久和