文档介绍：浙江理工大学
硕士学位论文
家蚕UBRPS27a基因克隆、表达及其功能的研究
姓名:叶嘉良
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:张耀洲
20070101
摘要泛肽一核糖体蛋白是泛肽和核糖体蛋白的融合蛋白,。在真核细胞中表达时,被酶解成泛肽和核糖体蛋白。端的泛肽蛋白主要参与细胞内的蛋白质选择性降解过程:说暮颂翘宓鞍在翻译过程中不可缺少。已发现核糖体蛋白在人结肠癌细胞中过表达,是一个早期生长反应基因:在胰腺癌细胞和临近胰腺癌细胞的癌前病变组织中也超常表达;在肝癌细胞罩也高表达;在胃癌细胞中,该基因的表达也远高于胃正常黏膜は赴W苤飧龆喙δ芎颂翘宓鞍自诟髦只钚栽鲋诚赴土鲎橹高度表达,在多种类型的肿瘤细胞中,该基因的过量表达是一个典型特征。在对家蚕蛹文库测序中,我们发现一个编码家蚕泛肽一核糖体蛋白基因的序列,我们对其进行生物信息学的分析并将其命名为。为研究的功能,,成功构建了原核表达质粒.,并转化感受态细胞甤璉盏急泶锖螅呀饩宓纳锨搴统恋矸别进行狿觳猓胍跣远哉障啾却τ小R惶匾煨蕴醮朐期值一致。重组蛋白以可溶的形式表达,通过亲和层析纯化了重组蛋白并使用该重组蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,效价为。利用多克隆抗体对家蚕进行亚细胞定位,结果显示细胞核与细胞质中都有分布。同时还进行了荧光定量治霾煌橹⑹逼诟没虻谋泶锊钜欤磕诓窝∮峁砻髟诟髯橹校咎搴统χ械谋泶锪孔畹停肯僦斜泶锪孔高;在卵、幼虫、蛹和蛾四个发育时期中,蛹的表达量最高,卵和幼虫中表达最较低。我们合成了的蠷弥侍遄H炯也下殉上皮细胞螅⑾至讼赴男翁⑴A吮浠合赴稍残巍⑼衷残伪涑闪梭形,甚至出现类似神经细胞的突触结构。对这一变化的机制,我们还将继续刈此研究。关键词:家蚕;核糖体蛋白;表达;细胞定位;荧光定量篟琔
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啡戋夏日期:年弓月浙江理工大学学位论文原创性声明本人郑重声明:我恪守学术道德,崇尚严谨学风。所旱交的学位论文,是本人存导师的指导懒⒔醒芯縧:作所取得的成果。除文中已明确注明和引用的内容外,本论文不包含任伺其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。沦文为本人亲自撰写,我刈所写的内容负责,并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:璕
,在——年解密后使用本版权书。日期:碲弓月切士囊坟浙江理工大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电予版,允许论文被查阅或借阅。本人授权浙江理工大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于学位论文作者签名:保密口不保密口指导教师签名日期:。
致谢叶嘉良一转眼,我的硕士研究生生涯即将落幕,回首两年半的求学经历,几多感慨几多欢笑。几年晕,很多老师和朋友在各方面给予了我大力的支持和帮助,值此论文完成之际,谨向他们表示最诚挚的谢意。首先,本论文是在导师张耀洲教授的悉心指导下完成的。本论文从设计、试验方案实施到论文撰写,结果的分析与讨论,撰写中的修改,都凝结着导师的心血。先生渊博的学识、开拓性的思维、严谨的治学态度、循循善诱、寓教于乐的教学方式和生动风趣的个性都使学生终生难忘,值此论文完成之际,弟子满怀感激。谨向恩师致以最深的谢意和敬意本论文的工作是在浙江理工大学生物化学研究所完成的,张老师一手缔造了朝气蓬勃的生化所,在这里我们感受着严谨的科研态度,浓厚的学术氛围。感谢生化所这个大家庭给予我学业和生活上的关心和支持;特别感谢吕正兵老师、陈健老师、聂作明老师、王丹老师对实验的建议与指导;感谢盛清老师、王江老师、张文平老师的热心帮助;感谢已经毕业的张文波博士等各位师兄师姐的帮助;感谢王雪冬、何玉琴等工作人员;感谢亲爱的各位同窗,和你们的友谊是我永远有价值的回忆,感谢刘玉生、孔令印、徐江涛、陈剑清、郑青亮、钱家伟、倪忠、王学健、舒特俊、周若冰、冯姗等各位同窗对我生活上的帮助和支持;大家的帮助使我顺利完成了论文,在此表示衷心感谢。感谢我最亲爱的父母和我的女友,因为你们的期待,