文档介绍：无菌方法验证
品名：
批号：

规格：
检查时间：
：硫乙醇酸盐流体培养基，批号：由：提供；
营养肉汤，批号：由：提供；
改良马丁培养基批号：由：提供。
：
金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)[CMCC(B) 26003] ；
枯草芽孢杆菌（ Bacillus subtilis ） [CMCC(B) 63501] ；
大肠埃希菌（ Escherichia coli ） [CMCC(B) 44102] ；
铜绿假单胞菌 (Pseudomonas aeruginosa) [CMCC(B) 10104]
生孢梭菌 (Clostridium sporogenes)[CMCC(B) 64941] ；
白色念珠菌 (Candida albicans)[CMCC(F) 98001] ；
(7) 黑曲霉菌 (Aspergillus niger) [CMCC(F)98003] 。
仪器和滤器： zw-2008 智能集菌仪 zw-808a 智能集菌仪
：中国药典 2005 版二部附录。
：
菌液制备：
取金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物少许接种
至营养肉汤培养基中 , 生孢梭菌的新鲜培养物少许接种至硫乙醇酸盐流体培养基中 , ℃
培养小时。
取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单孢菌、生孢梭菌肉汤培养物
，加生理盐水， 10 倍递增稀释至约 10-5~10-8 之间，其中金黄色葡萄球菌取
稀释级，铜绿假单孢菌取稀释级，大肠埃希菌取稀释级，枯草芽孢杆菌取
稀释级，生孢梭菌取

稀释级。
白色念珠菌的新鲜培养物接种至改良马丁培养基中
再取白色念珠菌真菌斜面培养物，加入生理盐水
为原液，取加生理盐水， 10 倍递增稀释至

, ℃培养小时。
洗下孢子，吸出转移至空试管作
，取加生理盐水，混匀备
用。
将黑曲霉菌斜面的新鲜培养物接种至改良马丁培养基上， ℃培养，使大量的孢
子成熟。再取黑曲霉真菌斜面培养物，加入生理盐水洗下孢子，吸出转移至空试管作
为原液，稀释至，取加生理盐水混匀备用。
菌液计数：分别取上述 5 种细菌菌液加入硫乙醇酸盐流体培养基中，每种菌
液做平行管。 ℃培养。分别取上述 2 种真菌菌液加入改良马丁培养
基中，每种菌液做平行

管。

℃培养

。细菌和真菌数计数结果分别见表

1 和
表 2。
菌种

大肠埃希菌

表 1 细菌数计数结果
金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌

铜绿假单胞菌