文档介绍：第一组徐玉秋、黄飞华、祁博、李诗赞、蔡东东、黄星星、杨孝刚生物制药一班指导教师:李先良 1 ?生物技术方法制备天然活性成分传统方法 1新兴提取技术 2发展趋势和应用 3 2 ?传统方法 Personal munal Voice 水煎煮法回流法自动索氏提取法索氏提取法浸渍和渗漉法3 ?各种传统方法的优缺点回流法易挥发的有机溶剂加热提取,则需采用回流法。浸渍和渗漉法水煎煮法自动索氏提取法浸渍和渗漉简单易行,一般在常温或温热条件下操作,适用于热不稳定成分的提取,但溶剂消耗量大,费时长, 提取效果差; 水煎煮法是我国最早使用的传统方法,大部分成分可被不同程度的煎出,但具有挥发性以及遇热易破坏的成分不宜用此法。这是溶剂萃取中最常使用的方法, 提取效率较高,但提取液受热时间长,热不稳定成分易分解。近来发展的自动索氏提取, 将高温渗漉与常规索氏提取相结合,溶剂用量比常规索氏提取少一半,且所需时间大幅度缩短。索氏提取法 4 ?新兴提取技术新兴提取技术新兴提取技术凝胶色谱技术凝胶色谱技术超临界流体萃取技术超临界流体萃取技术高效液相色谱技术高效液相色谱技术 5 ?超临界流体萃取技术?超临界流体分离过程的原理超临界流体对脂肪酸、植物碱、醚类、酮类、甘油酯等具有特殊溶解作用,利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系,即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超临界状态下,将超临界流体与待分离的物质接触,使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来。?超临界流体 CO2 萃取与化学法萃取相比有以下突出的优点?可以在接近室温(35-40 ℃)及CO2 气体笼罩下进行提取,有效地防止了热敏性物质的氧化和逸散; ?全过程不用有机溶剂,因此萃取物绝无残留溶媒,同时也防止了提取过程对人体的毒害和对环境的污染,是100% 的纯天然; ?萃取和分离合二为一,当饱含溶解物的 CO2-SCF 流经分离器时,由于压力下降使得 CO2 与萃取物迅速成为两相(气液分离)而立即分开,萃取效率高而且能耗较少,节约成本; ?CO2 是一种不活泼的气体,萃取过程不发生化学反应,且属于不燃性气体,无味、无臭、无毒,故安全性好; ?CO2 价格便宜,纯度高,容易取得,且在生产过程中循环使用,从而降低成本; ?压力和温度都可以成为调节萃取过程的参数。通过改变温度或压力达到萃取目的。压力固定,改变温度可将物质分离;反之温度固定,降低压力使萃取物分离,因此工艺简单易掌握,而且萃取速度快。 6 ?超临界流体萃取流程 SFE 的基本流程是: 由钢瓶提供高纯液体( CO 2)经高压泵系统,流入保持在一定温度(高于 Tc)下的萃取池。在萃取池中可溶于 SCF 的溶质扩散分配溶解在 SCF 中, 并随 SCF 一起流出萃取池,经阻尼器减压获升温后进入收集器,多余的 SCF 排空或循环使用。 SFE 的基本流程 7 ?凝胶色谱技术分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快;分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部,路程长,流动慢。凝胶过滤色谱( GPC ) 凝胶渗透色谱( GFC ) 生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学、医学等相关领域凝胶色谱的原理凝胶色谱的分类凝胶色谱的应用领域 8 ?凝胶色谱技术流程泵进样器色谱柱柱温箱检测器 THF, 氯仿, DMF 示差检测器凝胶渗透色谱装置 9 ?高效液相色谱的认识高效液相色谱仪高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。 1、吸附色谱 2、分配色谱 3、离子色谱 4、体积排阻色谱 5、亲和色谱主要类型一定义二 LC98 ⅡRI系列高效液相色谱仪(示差) GPC 10