文档介绍：第三军医大学
博士学位论文
T细胞因子4在毛囊毛乳头细胞中的表达及其功能研究
姓名:刘毅
申请学位级别:博士
专业:皮肤病与性病学
指导教师:郝飞
20080501
赴蜃在毛囊毛乳头细胞中的表达及其功能研究术摘要一、研究背景与目的位于毛囊基底部的特殊间质成分毛乳头细胞,在毛囊发育和周期性再生调控中起主导作用。在胚胎期,嘀终攵员砥さ牡鹘谝蜃樱偈表皮细胞增生分化形成毛囊。出生后毛囊的周期性再生过程中诱导上皮细胞增殖和分化的信号也来自S盏济倚纬墒荄最为显著的功能特征,δ艿囊斐变化是导致毛囊周期失衡和脱发现象的主要起始因素。因此对镅Чδ鼙浠调控机制进行深入研究,对毛囊生物学和毛发疾病的研究都有重大的意义。相关研究先后鉴定出数十种与喙氐牡骺匾蜃樱庑┑骺匾蜃釉贒和毛囊上皮细胞的相互作用中构成复杂的调控网络,但尚不能确定其中具有关键作用的因子或调控途径。研究表明,细胞在不同的生物学功能状态中表达的基因不同,基因表达的有序性、选择性是细胞功能变化的内在根据。因此,通过分析不同状态下虮泶锏牟钜欤可为揭示镅Чδ艿骺毓媛商峁┲匾P畔ⅰ;袢〔钜毂泶锏幕蚪兄诹私谏砗筒±硖跫鹿δ鼙浠姆肿踊疲C曳⒂兔抑芷谛陨さ骺匮究提供新的视野。在以往的研究中,本课题组使用抑制性消减杂交技术岷蟂合成技术对人活体组织中休止期毛囊吧て诿褼的表达差异进行了研究。椒ㄍü铰衷咏缓鸵种菩訮,可对两个样本的基因表达进行有效对比。运用合成技术合成,使对活体组织毛乳头标本进行基因表达差异研究成为可能。最终我们成功建立了毛乳头差异表达文库,为进一步阐述δ艿骺氐姆肿踊频於嘶从所建立的毛乳头差异表达文库中,我们首次发现了藕磐饭丶号分子赴蜃琓作为生长期毛囊纳系鞅泶锘颍⑹用反向笛槎愿媒峁辛搜橹ぁ贒中差异表达为首次发现,生第三军医大学博士学位论文易匀豢蒲Щ鹱手钅.
物学意义尚不明了。本课题拟研究谀陨ず头悄陨ぷ刺碌腡基因表达差异,以及对基因在镅Чδ艿骺刂械淖饔媒惺笛檠芯俊二、方法与结果甌蛟诿褼中的表达首先应用原位杂交技术检测斑秃患者和正常人头皮组织的基因的表达;应用细胞免疫荧光检测凝集性生长和非凝集性生长的人腡鞍椎谋泶铮的方法从上述两种细胞的总┰鯰颉=峁⑾諸蛟谡常头皮组织毛囊泶铮诎咄鹤橹业腄不表达;基因在凝集性生长期斜泶铮诜悄陨て贒不表达。表明基因在生长期中高水平表达。。首先从凝集性生长刑崛∽躌,。竦么忻盖形坏愕腡蚩寺。⑼ü盖泻筒庑蚪屑ā@弥侍H镜薪形榷ū泶铮觳庾H厩昂骉泶锏谋浠R晕醋H镜腄作为对照组,分别用流式细胞仪检测赴芷诘谋浠琖检测母蜗赴ひ子,、干细胞生长因子,的表达,比色法检测细胞生长曲线,—觳庀赴鲋场=峁砻鳎颐谴覦中获得基因克隆并且成功构建了真核表达载体。经过稳定转染,蠺趍偷白表达水平上调。与对照组相比,脑鲋衬芰拖喙叵赴蜃拥姆置谀芰Φ玫矫显提高。结果表明,基因可以促进鲋澈头置谙赴蜃拥墓δ堋甊干扰抑制表达对镅Чδ艿挠跋为了进一步探讨的表达对赴镅Чδ艿挠跋欤颐遣捎没Ш铣法合成訲⒆H綝。。以未转染腄作为对照组,用流式细胞仪检测赴芷诘谋浠琖检测囊鹊核匮因子一猧穕,蛃的表达,壬ǚḿ觳庀赴曲线,—觳庀赴鲋场=峁砻饔肟瞻锥哉兆橄啾龋组序列的和蛋白质表达均有明显降低,以序列橄陆得飨浴O赴鲋衬芰灾陆,第三军医大学博士学位论文
猯、泶锩飨越档停哉兆槲尴灾圆钜臁=峁砻鱐芟灾的表达,降低脑鲋衬芰Γ徊教崾綯贒生长调控中可能起到重要作用。三、结论甌蛟谏て贒中高表达。蛟贒中过表达使其细胞周期、生长曲线明显改变,细胞增殖明显增强,并促进置谙赴蜃印ü齊干扰降低基因的表达,可使赴鲋臣趼喙叵赴子的分泌受到抑制。通过以上实验,为深入了解基因以及藕旁诿抑芷谛缘骺刂械淖饔和机制奠定了基础。关键词:毛乳头细胞;赴蜃;基因表达;藕牛幌赴鲋常幌赴子;扇第三军医大学博士学位论文调
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