文档介绍：山东大学
硕士学位论文
稀土离子配合物与生物大分子(核酸、蛋白质)相互作用及其
分析应用的研究
姓名:贾贞
申请学位级别:硕士
专业:分析化学
指导教师:杨景和
20050901
核酸体系的相互作用机理进行了研究。研究认为,在”.订甈逑抵屑尤牒摘要在论文的第三部分中,研究了”.鞍字侍逑档挠ü庠銮啃вΓ核酸和蛋白质是生命现象的物质基础,对于它们的研究已经成为生命科学的重要内容。核酸是生物的基本遗传物质,是一种十分重要的生物大分子,与生物的生长,发育以及癌变,突变等异常活动相关。蛋白质则是生物体含量最丰富的大分子物质,也是机体各种生理活动的物质基础。核酸和蛋白质的定量测定是生物化学和其它生物学科中经常涉及的分析任务,是临床检验中诊断疾病及检查治疗效果的重要指标,也是许多生化药物分离提纯中质量检验及食品检验中常见的分析项目。定量测定核酸和蛋白质的方法很多,其中探针技术是研究核酸和蛋白质结构、功能、定性、定量的重要手段,对核酸和蛋白质探针的研究己成为生命科学领域的前沿课题。本论文从探索新的核酸和蛋白质荧光探针及其相互作用机理和发光机理出发,以荧光为主要研究手段进行了研究。论文的第一部分综述了荧光和共振光散射技术在核酸和蛋白质测定中的分析应用及研究进展。在论文的第二部分中,研究了核酸对..体系的荧光和共振光散射的猝灭效应,并应用于核酸的定量测定,在第一节中,研究了体系中荧光猝灭效应。研究发现,核酸能猝灭瓵体系的荧光强度。在最佳实验条件下,建立了核酸的浓度与猝灭的荧光强度之间的线性方程,甊,蚦的检出限分别为痬.⋯痬8梅ㄒ延糜谀饽辖媸导样品中核酸含量的定量测定,得到满意的结果。在第二部分第二节中,研究了”—.核酸体系中的共振光散射猝灭效应,,蚦的检出限分别为痬琌./,/。同时,本文对”.甈酸后,核酸中的磷酸根更容易与”.甈逑抵械腅⑸驳缃岷戏从Γ从而置换出化合物中的,因而引起了体系荧光强度及共振光散射强度的降低。建立了测定蛋白质的新方法。己知”和生成的”.衔锬芊⑸銽离子的特征荧光,但荧光强度很弱。而在存在下,蛋白质能明显地增强体系的荧光强度,增强的荧光强度与蛋白质的浓度在一定范围内成正比。在最佳实验条件下,琀和的线性范围分别为ǎ..’
疚奶教至说鞍字视隩畁’蚅钙に靥逑迪嗷プ饔玫幕恚衔玤/,检出限分别为,和/。该方法应用于实际样品人血清白蛋白和鸡蛋蛋白中蛋自质含量的测定,结果令人满意。同时研究了体系的荧光增强机理,认为和ü驳缱饔糜隩甌结合。生成大的甌..绾衔铮煌盨瓸为”.峁┝艘桓隽己玫氖杷境,减少了络合物和水分子之间的碰撞,从而减少了因碰撞而导致的能量损失,提高了体系的荧光量子产率,使郥逑档挠ü馇慷却蟠笤銮俊论文的第四部分研究了棵皮素...蛋白质体系的荧光增强效应及在蛋白质定量分析中的应用。已知能和发生反应,生成衔铮该化合物发射的特征荧光,但荧光强度较弱。而在存在下,蛋白质的加入使.”.体系的荧光强度增强,增强的荧光强度在一定范围内与蛋白质的浓度成线性关系。在最佳实验条件下,琀,的线性范围分别为’..一痬斐鱿薹直鹞..和./。该法已用于实际样品中蛋白质含量的测定,结果令人满意。同时探讨了该体系的荧光增强机理,认为跃驳缫蚐暗鞍字史⑸;┝己玫氖杷肪常庖换肪尘哂薪系偷募院徒洗蟮奈⒄扯龋此降低了退肿又涞呐鲎玻跎倭艘蚺鲎驳贾碌奶逑的芰克鹗В岣了体系的荧光量子产率,使体系的荧光强度大大增强。本论文的主要特点:芯糠⑾郑怂岫韵⊥,该体系已用于实际样品中核酸含量的测定。本方法为核酸的测定提供了一个新的发光探针,本法具有操作简便、快速、线性范围宽、灵敏度高等特点,成为核酸最灵敏的发光测定方法之一。,因而提出了两种测定蛋白质的新的荧光技术,并用于实际样品的测定。该方法具有简便快速、灵敏度高等特点,特别是成为测定蛋白质灵敏的荧光探针之一。和蛋白质可形成珠琏状络合物,该络合物可通过静电引力和疏水作用力与稀山东大学硕士学位论文唬×~,
土配合物形成大的络合物,和蛋白质为配合物提供了较好的疏水环境,并减少了与水分子碰撞而生成的能量损失,从而使体系的荧光大大增强。关键词:荧光,核酸,蛋白质,绶蛹柞H#诜七苓榔に兀二烷基苯磺酸钠,稀土离子山东大学硕士学位论文
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